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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】酶切体系
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j2

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酶切体系 已有6人参与

一般酶切体系是20ul总体积含1ul酶，想请教一下如果酶切体系里面酶多了，比如20ul总体积里面有10ul的酶，会怎样？
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
1楼 2010-08-19 11:22:36
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夜龙舞

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
酶多了，相应的缓冲体系也得改变，而你的总的体系不变，可想酶切效率会降低。
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6楼2010-08-19 13:12:29
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
酶都是保存在甘油里的，高甘油浓度可以使限制性内切酶产生星活性，发生非特异性切割
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2010-08-19 11:25:08
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zxping11230

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+2):鼓励交流 2010-08-19 16:10:57
酶都是用甘油保存的（含50%），酶切体系中的甘油含量要求不超过5%，过了会造成非特异性酶切，即所谓的星号活力。20ul总体积里面有10ul的酶，甘油已达到了25%。
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快乐的科研
3楼2010-08-19 11:27:28
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月月大可

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励 2010-08-19 16:11:10
酶切酶中50%是甘油。反应体系中甘油超过5%就会对酶的活性产生影响，所以反应体系中酶的总量不建议超过10%。
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4楼2010-08-19 12:16:26
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