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j2

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酶切体系 已有6人参与

一般酶切体系是20ul总体积含1ul酶,想请教一下如果酶切体系里面酶多了,比如20ul总体积里面有10ul的酶,会怎样?
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修炼ing,当虫仙……
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

酶都是保存在甘油里的,高甘油浓度可以使限制性内切酶产生星活性,发生非特异性切割
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2楼2010-08-19 11:25:08
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zxping11230

铁虫 (小有名气)

★ ★ ★
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看天(金币+2):鼓励交流 2010-08-19 16:10:57
酶都是用甘油保存的(含50%),酶切体系中的甘油含量要求不超过5%,过了会造成非特异性酶切,即所谓的星号活力。20ul总体积里面有10ul的酶,甘油已达到了25%。
快乐的科研
3楼2010-08-19 11:27:28
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月月大可

木虫 (著名写手)

★ ★
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看天(金币+1):鼓励 2010-08-19 16:11:10
酶切酶中50%是甘油。反应体系中甘油超过5%就会对酶的活性产生影响,所以反应体系中酶的总量不建议超过10%。
4楼2010-08-19 12:16:26
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j2

木虫 (正式写手)

多谢大家,我是不是可以理解为即使酶的总量高了,总体系里还是有酶切好的基因,但是量会比较低
修炼ing,当虫仙……
5楼2010-08-19 12:42:11
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夜龙舞

金虫 (小有名气)


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酶多了,相应的缓冲体系也得改变,而你的总的体系不变,可想酶切效率会降低。
6楼2010-08-19 13:12:29
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banhf

新虫 (初入文坛)

酶多了会加快酶切速度,当然也会引起酶的星号活性,一般不建议多加
7楼2010-08-19 17:22:00
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