应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒提不出来什么原因？
71/1返回列表
查看: 1963  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】质粒提不出来什么原因？ 已有1人参与

最近连接T载体后，做菌液PCR有目的条带，提质粒跑电泳带很微弱或是没有，但做质粒PCR条带很亮。不知是什么原因。送测序公司，测序公司也说提不出质粒。郁闷中。。。有那位大侠帮帮，不胜感激！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-10 16:42:36
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

idealhy

金虫 (小有名气)
小虫子666(金币+1): 2010-08-10 17:17:52
小虫子666(金币+1):和他同一批次做的转化的其他基因都能提出质粒，而且测序正确，但这个就是提不出来，送了4次测序公司也说提不出来。不知原因。 2010-08-10 17:19:56
会不会是质粒浓度不够，pcr只要有几个拷贝就能扩增的，但是提取质粒要大量的。
我个人建议，是否抗生素浓度没控制好或者忘记加了？再就是你质粒抽提的问题。。
赞一下 回复此楼
2楼2010-08-10 17:03:02
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixg

铁杆木虫 (正式写手)
小虫子666(金币+1): 2010-08-15 09:13:17
小虫子666(金币+1):一人再送个 2010-08-15 09:15:05
很可能是目的片段较长，连接没成功。再做次连接试试。
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-10 18:18:56
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
小虫子666(金币+1): 2010-08-15 09:13:05
小虫子666(金币+1):一人再送个 2010-08-15 09:14:59
换个受体菌
回复此楼
4楼2010-08-10 18:37:06
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
小虫子666(金币+1): 2010-08-15 09:13:02
小虫子666(金币+1):一人再送个 2010-08-15 09:14:54
很可能是杂菌
回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
5楼2010-08-13 20:23:14
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)
小虫子666(金币+1): 2010-08-15 09:12:58
小虫子666(金币+1):一人再送个 2010-08-15 09:14:48
引用回帖:
Originally posted by 小虫子666 at 2010-08-10 16:42:36:
最近连接T载体后，做菌液PCR有目的条带，提质粒跑电泳带很微弱或是没有，但做质粒PCR条带很亮。不知是什么原因。送测序公司，测序公司也说提不出质粒。郁闷中。。。有那位大侠帮帮，不胜感激！

杂菌的可能性比较大，最好重做。你酶切一下，看看能不能切出来？
赞一下 回复此楼
6楼2010-08-13 21:53:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

麻花13

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+2): 多多交流 2012-03-06 10:51:17
1 建议多做几管，在提取过程前期，每管按照原来的方案添加试剂，然后以此将每管通过一个收集柱，这样就起到了浓缩的作用
2 建议在摇菌时，测一下OD值，当然，在OD到达最高时提质粒最好（以前做过，OD在到达最高后，会下降，表观为菌液变得清澈，并出现絮状沉淀，个人认为只是细菌大规模死亡积聚造成）
3 说了那么多，其实其关键作用的还是菌活力本身，如果不行，建议换菌
赞一下 回复此楼
7楼2012-03-06 10:33:47
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小虫子666 的主题更新
71/1返回列表
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 4/200 2026-08-23 01:04 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 8/400 2026-08-23 00:28 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +3 简单化xn 2026-08-22 7/350 2026-08-22 19:46 by 简单化xn
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭