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黎亚丽

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】IPTG已有11人参与

在SDSPAGE凝胶电泳中,IPTG是诱导重组菌蛋白的表达,那IPTG在诱导过程中对菌生长有那些影响?
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姜大磊

木虫 (小有名气)


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Originally posted by wdyym at 2010-07-27 09:52:02:
个人经验发现高浓度的IPTG影响大肠杆菌生长,若楼主只是为了验证蛋白是否表达,可以直接用3mM诱导,这个浓度下,一般达到饱和。若已经表达,为了找一个合适的浓度,楼主可以做一个诱导梯度,从而找到最佳诱导浓度

请问一下ITPG在哪里可以买到啊,什么价位啊?IPTG是诱导剂,可以诱导蛋白表达,如果要通过蓝白斑筛选的话是不是需要往培养基里加X–Gal 这个物质啊,谢谢指教!
Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
15楼2010-08-04 12:32:35
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姜大磊

木虫 (小有名气)


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Originally posted by wdyym at 2010-08-07 09:32:06:



一般的生物公司都可以买到,生产公司不同,价格也有很大的差异。蓝白斑筛选必须要加X-GAL,你可以在制备平板的时候直接加到培养基里(注意要等培养基降至50度以下再加),也可以在使用之前涂布在平板表面。

请问做蓝白班筛选的时候 ITPG 和 X-GAL  大概需要多大的浓度算合适啊,谢谢。 抽虑后,用的时候直接加入涂在固体培养基上吗?
Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
19楼2010-09-06 07:36:47
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