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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】转化实验中IPTG量多少对转化的影响
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欣如止水

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】转化实验中IPTG量多少对转化的影响 已有6人参与

转化实验中加入的IPTG的量偏少对转化实验有什么影响啊？谢谢啊
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1楼 2010-05-07 15:51:49
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gaiyf

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-07 22:53:25
应当不会有什么影响吧，应为iptg主要是用于后来的蓝白斑选择的，对于转化过程不会有什么影响。最多也就是在最后蓝白斑不是很明显吧
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多看文献，多学知识
2楼2010-05-07 16:23:46
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
同意楼上，有的时候不加IPTG也能行，IPTG就是促进表达的，少一点，问题不是很大
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3楼2010-05-07 16:50:30
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dongyi3041

新虫 (初入文坛)

蓝白斑筛选

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
IPTG与X-gal进行蓝白斑筛选，与转化效率没有关系，主要是否插入片度！
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我是兽医
4楼2010-05-07 20:47:42
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huaq1984

银虫 (初入文坛)
ITPG不影响链接吧，他和转化效率无关，关键是连接
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5楼2010-05-07 23:13:32
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-05-07 16:50:30:
同意楼上，有的时候不加IPTG也能行，IPTG就是促进表达的，少一点，问题不是很大

不太明白，诱导性启动子不加诱导底物，阻遏蛋白不能从启动子上解离下来能启动下有基因的表达吗，这样岂不是全是白斑，那蓝白斑还有啥用啊
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
6楼2010-05-08 00:42:12
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-05-08 00:42:12:

不太明白，诱导性启动子不加诱导底物，阻遏蛋白不能从启动子上解离下来能启动下有基因的表达吗，这样岂不是全是白斑，那蓝白斑还有啥用啊

有的时候启动确实是不需要诱导的，这一般跟细胞有关系，但是通常IPTG是需要的，但是量的影响不是很大
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7楼2010-05-08 13:41:16
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todouhy

铜虫 (小有名气)
肯定是有影响的啊，IPTG作为有机溶剂，量多的话会抑制菌的生长，所以我们实验室是根据分子克隆上面的量加取的！
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8楼2010-05-08 15:06:18
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