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欣如止水

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】转化实验中IPTG量多少对转化的影响 已有6人参与

转化实验中加入的IPTG的量偏少对转化实验有什么影响啊?谢谢啊
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gaiyf

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-07 22:53:25
应当不会有什么影响吧,应为iptg主要是用于后来的蓝白斑选择的,对于转化过程不会有什么影响。最多也就是在最后蓝白斑不是很明显吧
多看文献,多学知识
2楼2010-05-07 16:23:46
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

同意楼上,有的时候不加IPTG也能行,IPTG就是促进表达的,少一点,问题不是很大
3楼2010-05-07 16:50:30
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dongyi3041

新虫 (初入文坛)

蓝白斑筛选

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
IPTG与X-gal进行蓝白斑筛选,与转化效率没有关系,主要是否插入片度!
我是兽医
4楼2010-05-07 20:47:42
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huaq1984

银虫 (初入文坛)

ITPG不影响链接吧,他和转化效率无关,关键是连接
5楼2010-05-07 23:13:32
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-05-07 16:50:30:
同意楼上,有的时候不加IPTG也能行,IPTG就是促进表达的,少一点,问题不是很大

不太明白,诱导性启动子不加诱导底物,阻遏蛋白不能从启动子上解离下来能启动下有基因的表达吗,这样岂不是全是白斑,那蓝白斑还有啥用啊
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
6楼2010-05-08 00:42:12
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-05-08 00:42:12:

不太明白,诱导性启动子不加诱导底物,阻遏蛋白不能从启动子上解离下来能启动下有基因的表达吗,这样岂不是全是白斑,那蓝白斑还有啥用啊

有的时候启动确实是不需要诱导的,这一般跟细胞有关系,但是通常IPTG是需要的,但是量的影响不是很大
7楼2010-05-08 13:41:16
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todouhy

铜虫 (小有名气)

肯定是有影响的啊,IPTG作为有机溶剂,量多的话会抑制菌的生长,所以我们实验室是根据分子克隆上面的量加取的!
8楼2010-05-08 15:06:18
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