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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 加IPTG,x-GAL,AMP时注意事项
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twisty

木虫 (正式写手)

newer

[求助] 加IPTG,x-GAL,AMP时注意事项

每次作连接和转化时都遇到这个问题，文献上说法也不一，感觉做起来时也很不方便，哪位在这块有心得，拿出来分享一下，也让我们这些菜鸟们长长见识。
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兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&n...
1楼 2012-01-04 09:11:32
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回帖置顶 ( 共有1个 )

wleileiyu555

新虫 (初入文坛)
★
西瓜(金币+1): 欢迎积极交流 2012-01-06 18:50:05
twisty: 回帖置顶 2012-01-07 08:07:50
AMP加到培养基里，IPTG和X-gal涂在培养基表面，最后涂菌液。
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6楼2012-01-06 10:09:17
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普通回帖

lufuhao

木虫 (著名写手)

极品木虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+3): Good！ 2012-01-04 12:34:17
AMP一般加到培养基里面，也可以涂在表面

如果是后者，一般先涂Amp，然后是IPTG与X-Gal一起加一起涂（注意涂板的时候用玻璃棒混匀）

三者一起涂也可以，不过涂板之前，最好把板37度正置约30min，说不清原因
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将心比心
2楼2012-01-04 10:49:45
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2, 专家考核): 经验丰富又细心，呵呵 2012-01-05 08:34:04
引用回帖:
2楼: Originally posted by lufuhao at 2012-01-04 10:49:45:
AMP一般加到培养基里面，也可以涂在表面

如果是后者，一般先涂Amp，然后是IPTG与X-Gal一起加一起涂（注意涂板的时候用玻璃棒混匀）

三者一起涂也可以，不过涂板之前，最好把板37度正置约30min，说不清原因

把平板先放30min是为了让多余的水分挥发掉，这样涂药物的时候不至于迟迟干不了。这个可以根据平板干湿情况来考虑，如果是刚倒的板或者刚从冰箱里拿出来的板，最好就这样晾一下。要是在室温放过一段时间的平板，就不必要了。
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3楼2012-01-04 12:36:16
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fanfenggui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助哦 2012-01-05 08:17:06
你可以向培养基里加点儿氨苄或者卡纳再倒板，就不用IPTG一类的了，可以试试，最近正在做，
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爱由心起！
4楼2012-01-05 00:14:08
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gjs713

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
twisty(金币+2): 感谢 2012-01-05 10:04:48
AMP是在倒平板时加入，平板放置过夜。IPTG和x-GAL在涂布菌液时混在一起涂布就好了。效果非常好。
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勤奋、执着、专注，则无坚不破。
5楼2012-01-05 08:07:52
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twisty

木虫 (正式写手)

newer
引用回帖:
楼: Originally posted by lufuhao at 2012-01-04 10:49:45:
AMP一般加到培养基里面，也可以涂在表面

如果是后者，一般先涂Amp，然后是IPTG与X-Gal一起加一起涂（注意涂板的时候用玻璃棒混匀）

三者一起涂也可以，不过涂板之前，最好把板37度正置约30min，说不清原因

平板正置的原因是尽量散去过多的水份，使结果更易见。
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兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&n...
7楼2012-01-07 08:09:42
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hsskcc

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fanfenggui at 2012-01-05 00:14:08
你可以向培养基里加点儿氨苄或者卡纳再倒板，就不用IPTG一类的了，可以试试，最近正在做，

请问你的氨苄多加了多少才不用加IPTG了？
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8楼2012-07-17 17:22:24
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琴心lm

新虫 (初入文坛)
为什么加了氨苄就不用加IPTG了呢？？能帮忙解释下不！！
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9楼2013-05-03 20:14:15
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gongming2199

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lufuhao at 2012-01-04 10:49:45
AMP一般加到培养基里面，也可以涂在表面

如果是后者，一般先涂Amp，然后是IPTG与X-Gal一起加一起涂（注意涂板的时候用玻璃棒混匀）

三者一起涂也可以，不过涂板之前，最好把板37度正置约30min，说不清原因

我想问下IPTG与X-Gal一起加一起涂，量用多少啊
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努力做成功的自己！
10楼2016-01-23 11:09:52
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