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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 加IPTG,x-GAL,AMP时注意事项
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twisty

木虫 (正式写手)

newer

[求助] 加IPTG,x-GAL,AMP时注意事项

每次作连接和转化时都遇到这个问题，文献上说法也不一，感觉做起来时也很不方便，哪位在这块有心得，拿出来分享一下，也让我们这些菜鸟们长长见识。
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1楼 2012-01-04 09:11:32
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fanfenggui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助哦 2012-01-05 08:17:06
你可以向培养基里加点儿氨苄或者卡纳再倒板，就不用IPTG一类的了，可以试试，最近正在做，
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爱由心起！
4楼2012-01-05 00:14:08
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lufuhao

木虫 (著名写手)

极品木虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+3): Good！ 2012-01-04 12:34:17
AMP一般加到培养基里面，也可以涂在表面

如果是后者，一般先涂Amp，然后是IPTG与X-Gal一起加一起涂（注意涂板的时候用玻璃棒混匀）

三者一起涂也可以，不过涂板之前，最好把板37度正置约30min，说不清原因
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将心比心
2楼2012-01-04 10:49:45
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2, 专家考核): 经验丰富又细心，呵呵 2012-01-05 08:34:04
引用回帖:
2楼: Originally posted by lufuhao at 2012-01-04 10:49:45:
AMP一般加到培养基里面，也可以涂在表面

如果是后者，一般先涂Amp，然后是IPTG与X-Gal一起加一起涂（注意涂板的时候用玻璃棒混匀）

三者一起涂也可以，不过涂板之前，最好把板37度正置约30min，说不清原因

把平板先放30min是为了让多余的水分挥发掉，这样涂药物的时候不至于迟迟干不了。这个可以根据平板干湿情况来考虑，如果是刚倒的板或者刚从冰箱里拿出来的板，最好就这样晾一下。要是在室温放过一段时间的平板，就不必要了。
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3楼2012-01-04 12:36:16
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gjs713

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
twisty(金币+2): 感谢 2012-01-05 10:04:48
AMP是在倒平板时加入，平板放置过夜。IPTG和x-GAL在涂布菌液时混在一起涂布就好了。效果非常好。
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勤奋、执着、专注，则无坚不破。
5楼2012-01-05 08:07:52
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