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| 在SDSPAGE凝胶电泳中，IPTG是诱导重组菌蛋白的表达，那IPTG在诱导过程中对菌生长有那些影响？ |
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2楼2010-07-26 19:12:14
holyala
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amisking(金币+5):good！ 2010-07-26 20:50:29
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诱导原理： E.coli的乳糖操纵子（元）含Z、Y及A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶，此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节 基因I（图15-4）。I基因编码一种阻遏蛋白，后者与O序列结合，使操纵子（元）受阻遏而处于关闭状态。在启动序列P上游还有一个分解（代谢）物基因激 活蛋白（CAP）结合位点。由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区，三个酶的编码基因即由同一调控区调节，实现基因产物的协调表 达 。在没有乳糖存在时，lac操纵子（元）处于阻遏状态。此时，I序列在PI启动序列操纵下表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合，阻碍RNA聚合酶与P序列结 合，抑制转录起动。当有乳糖存在时，lac操纵子（元）即可被诱导。在这个操纵子（元）体系中，真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞，经b－半乳糖苷 酶催化，转变为半乳糖。后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白，使蛋白构象变化，导致阻遏蛋白与O序列解离、发生转录。异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）是一 种作用极强的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定，因此被实验室广泛应用。 另外建议LZ回去多看看分子克隆实验指南之类的书。 |
3楼2010-07-26 19:22:06
花花贝
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shuiyue2728
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