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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » 【求助】求助：cDNA扩增后电泳没有显示
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zzq770204

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】求助：cDNA扩增后电泳没有显示 已有8人参与

本人用rna逆转录后扩增，跑电泳，但是什么都没有，不知是什么原因，急求高手指点，不胜感激！另rna经过检测发现正常，没有降解。
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1楼 2010-07-10 21:06:45
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leilei2007

木虫 (正式写手)
★ ★
zzq770204(金币+1):谢谢参与
zzq770204(金币+5):这个没有错误，我是rna、dna marker和cdna一起的，其它2个都有 2010-07-11 08:37:45
xiaowuhehe(金币+1):感谢参与讨论 2010-07-24 13:33:10
是不是电源插错槽了，这样根本就跑不出来，在仔细检查一下
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2楼2010-07-10 22:58:23
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longanzz

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
zzq770204(金币+1):谢谢参与
三个小石子(金币+1):感谢热心讨论，欢迎常来理工农林版！ 2010-07-12 00:00:42
zzq770204(金币+15): 2010-07-12 07:48:09
cDNA扩增后电泳没有结果的原因太多了。一、你的cDNA模板有没有问题二、你的扩增程序有没有问题，三、你的扩增引物有没有问题。你一样样检测一下看看了。祝你好运！
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3楼2010-07-11 22:11:42
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
zzq770204(金币+1):谢谢参与
三个小石子(金币+1):感谢热心讨论，欢迎常来理工农林版！ 2010-07-12 09:40:34
zzq770204(金币+20):这个办法比较好 2010-07-12 14:46:57
zzq770204(金币+5): 2010-07-16 13:04:41
zzq770204(金币+10):是按照你的方法解决了问题，谢谢 2010-07-16 13:05:23
先拿一对内参基因的引物做个PCR检测看反转是否成功，最好是实验室里常用的别人用都没有问题的引物和程序。

一般来说，引物降解的可能性比较大，可以用DNA做模板同时扩增作为阳性对照。
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4楼2010-07-12 09:35:55
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liujunhero

新虫 (文学泰斗)

文献杰出贡献文献杰出贡献
★
zzq770204(金币+1):谢谢参与
xiaowuhehe:理工农林班应该也有做这方面的 2010-07-13 15:14:51
zzq770204(金币+5): 2010-07-16 13:03:36
最好发在生物科学版啊
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5楼2010-07-12 16:18:18
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kobe8md1

铁虫 (初入文坛)
★ ★
zzq770204(金币+1):谢谢参与
green1223(金币+1):感谢人心帮助！欢迎常来农林版！ 2010-07-16 08:29:56
zzq770204(金币+15):谢谢！问题解决了，是PCR的循环次数少了 2010-07-16 13:03:26
你应该说清楚点，是做的RT 还是只反转录，电泳胶上什么都没有吗？ 最后贴张图啊。  如果什么都没有，RNA没问题，引物出问题的可能性大。
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6楼2010-07-15 14:17:55
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fascinating

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
xiaowuhehe(金币+1):感谢参与讨论 2010-07-24 13:33:36
最好能发个图，才好分析。到底是反转时出现了问题，还是引物的问题。不过从你的描述来看，多半是引物的问题。
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7楼2010-07-17 15:03:18
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zzq770204

至尊木虫 (著名写手)
后来用其他引物进行扩增几次,发现可能是我以前做的循环次数比较少，cdna浓度太低了,
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8楼2010-07-17 16:41:44
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huofuman

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
xiaowuhehe(金币+1):感谢参与讨论 2010-07-24 13:34:01
RNA出问题的可能性最大
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9楼2010-07-23 16:23:40
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