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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于酶蛋白的比活力及其纯化倍数之间的关系
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于酶蛋白的比活力及其纯化倍数之间的关系 已有7人参与

需要找一个编码蛋白比活力较高的基因序列，看来不少文献。而一般的蛋白比活力的数
据往往会因为纯化倍数（Purification fold）的提高而提高，比如亲和层析、离子交换
层析等等。因为没有接触过这方面的内容，不知道文献中所谓的纯化倍数是什么概念？


简单举个例子

蛋白A：

在粗酶液中的比活力是3.2U/mg，经超滤纯化2倍，收率71.6%，比活力达到7.6U/mg

再经DEAE离子交换柱，纯化倍数6倍，收率49.6%，比活力达到20.6

进一步地，经MonoQ离子交换层析，纯化倍数21倍，收率34.6%，比活力66.2

最后经羟磷灰石层析，纯化倍数34倍，收率22.3%，比活力110U/mg

蛋白B：

在粗酶液中比活力5U/mg，亲和层析后纯化3.88倍，收率27.5%，比活力19.4

再经下一步，纯化6.04倍，收率22.7%，比活力30.2

这个要怎么比较两者的比活力？purification fold在比较中扮演的是什么角色？

谢谢！！！
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1楼 2010-07-01 14:06:16
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-02 05:25:47
纯化倍数就是经过纯化后得到的比活力与纯化前比活力之间的比值。
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2楼2010-07-01 15:12:23
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2010-07-01 15:12:23:
纯化倍数就是经过纯化后得到的比活力与纯化前比活力之间的比值。

嗯，我查到了
那么既然经过纯化了，而且还是不同方法，还如何比较两者的比活力高低啊？
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3楼2010-07-01 16:54:22
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看天

木虫 (知名作家)
★ ★ ★
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lmzxcom1:正解 2010-07-01 18:34:52
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-02 05:26:14
引用回帖:
Originally posted by melodyxin at 2010-07-01 16:54:22:

嗯，我查到了
那么既然经过纯化了，而且还是不同方法，还如何比较两者的比活力高低啊？

比活力与纯化方法无关 就是单位单位蛋白中的酶活力
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
4楼2010-07-01 17:19:31
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 看天 at 2010-07-01 17:19:31:

比活力与纯化方法无关 就是单位单位蛋白中的酶活力

哦，可是如果纯化的话，酶活力一定是会升的呀。这怎么平行对比呢？
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5楼2010-07-01 22:21:21
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gzxb_813

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by melodyxin at 2010-07-01 22:21:21:


哦，可是如果纯化的话，酶活力一定是会升的呀。这怎么平行对比呢？

酶纯化的过程中也会失活的，所以要快、稳、狠、准
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Make a wish！
6楼2010-07-01 22:41:54
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
比活力之比就是纯化倍数，个人理解
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7楼2010-07-01 22:47:02
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gzxb_813 at 2010-07-01 22:41:54:

酶纯化的过程中也会失活的，所以要快、稳、狠、准

所以结论就是，无法从文献中获知酶活较高的蛋白了。？？？
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8楼2010-07-03 11:45:54
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ashelychan

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
纯化蛋白质时，单看酶活没有意义，一般都是要算它的比酶活，即它的纯度（每mg蛋白所含有的酶活力单位）。
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我奋斗，所以我精彩；我快乐，所以我精彩；我自信，所以我精彩
9楼2012-01-08 01:29:34
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jackenmickey

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
10楼2012-08-22 22:01:53
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