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泡泡9706

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于大肠杆菌中蛋白表达的问题 已有8人参与

在大肠杆菌中表达了一个酶蛋白,该酶在原菌中是胞外酶,在载体上插入的是酶基因包括信号肽在内的全部序列,请问一下,有可能会在胞内或者周质空间产生切去信号肽的该酶吗?
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silicare

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优秀版主

1949stone:把包涵体洗出来不就好了 大量表达 后来的复性也学有难度 如果是有活性的 乐开花了 2010-06-13 16:00:53
泡泡9706(金币+1): 2010-06-17 16:59:41
看运气,不形成包涵体你就万幸吧
3楼2010-06-13 15:29:46
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biogefart

木虫 (著名写手)


泡泡9706(金币+1):谢谢!那外源的信号肽大肠杆菌也有可能识别吗? 2010-06-13 14:36:54
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-06-13 15:59:05
胞内不太可能吧,应该在周质里面
闹太套
2楼2010-06-13 14:16:45
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liyong1981

金虫 (正式写手)


泡泡9706(金币+1): 2010-06-17 16:59:37
这个,真不好说,做了才知道,因为原核生物表达出的蛋白比真核的复杂,你都不知道它到底怎么折叠的,那3级结构,千奇百怪~
4楼2010-06-13 16:46:59
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师


reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-06-15 07:54:04
原菌的信号肽是否被大肠杆菌所识别和你的酶蛋白在大肠杆菌中可溶(正确折叠)是关键,没有文献支持的话只有自己试了才知道结果!哈哈
大家共同交流、共同提高!!!
5楼2010-06-15 00:57:30
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