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牵着猎人的狼

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】pcr问题求助已有8人参与

请问谁p过真菌的ITS?
小半年了，一直p都没p出来，ITS应该是很保守的序列，我p的是尖孢镰刀菌的。
我用的引物是：
ITS4：TCC TCC gCT TAT TgA TAT gC Tm：55.75
ITS5：ggA Agg TAA AAg TCA Agg Tm：52.74
我的体系是：20
双蒸水：12
10*buffer：2
镁离子：1.5
dNTP：1
P1：1
P2：1
模版：1
Taq酶：0.5
程序：94度5min，94度30s，44度45s，72度1min(30 cycle) 72度10min 4度保存。
请指教，不胜感激

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