| 查看: 3502 | 回复: 16 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】跪求反转录失败的原因已有8人参与
|
|||
 这是我最近提取的RNA电泳图，图本身看上去不太好，所以就测了od值A260/A280为2.0。 接着做反转录，按照takara AMV 3.0反转录试剂盒进行操作。内参的条带很好，但目的基因的条带始终呈弥散状，反转录条件如下设置： (42度 30分钟，99度 5分钟，5度5分钟) 1循环； pcr设置： 94度 5分钟；(94度 30秒，52度 30秒，72度 1分钟) 50个循环；72度 7分钟。 设置50个循环是个人觉得cDNA的量较少，根据说明书来调整的。  这是反转录的条带，左边两条带呈弥散状，右边是指示条带，想看看rna抹带在什么位置，如果反转录成功，那么得到的条带应与右边条带位置相同。这两个rna条带是分别用两组引物来反转录的，也试过调整引物、退火温度等，但是已经做了近半年了，依然是这样的条带。求各位帮忙，谢谢! |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有245人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
反转录之后PCR扩增片段问题的请教，急急急
已经有5人回复- 请教RNA提取高手：反转录PCR（RT-PCR)中DNA的去除
已经有18人回复
- mRNA反转录2.3kb有没有问题
已经有7人回复
- 反转录高手进来~~
已经有8人回复
- 反转录
已经有16人回复
- 它怎么就反转录不出来，求教
已经有4人回复
- TakaRa的反转录酶和promega的反转录酶那个好呀
已经有12人回复
- RNA浓度只有几十ng/ul，不知道可不可以反转录做RT（在线急等）
已经有12人回复
- 【求助/交流】关于RNA反转录问题
已经有26人回复
- 【求助/交流】我做了SSH，测序了400个。反转录序列与NCBI比对还用将其反向吗
已经有3人回复
- 【求助/交流】反转录过程中的问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】反转录时该选用oligo dT还是 随机6引物？
已经有9人回复
- 【求助/交流】提血液RNA浓度很低，怎样使其浓度高从而用于反转录
已经有16人回复
pidou213
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2446.1
- 散金: 400
- 红花: 5
- 帖子: 913
- 在线: 45.9小时
- 虫号: 448545
- 注册: 2007-11-01
- 性别: GG
- 专业: 农业昆虫学
13楼2010-05-12 23:33:08