| 查看: 2566 | 回复: 9 | |||
cpn木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】难看的琼脂糖电泳谱图 已有8人参与
|
最近跑的琼脂糖电泳谱图奇丑无比。  用的别人的1*TAE，0.7%Agarose，100V恒压跑半个小时（电流从110mA增大到最后140mA）。 染料是一个国产的牌子，Genefinder，预加在胶里的。 琼脂糖用的biowest。 图上两个条带都是marker，最右边是1kb的marker，往左是hind III lambda DNA marker（Takara的）。 条带都有不同程度拖尾变形，1kb marker的条带看上去还有些弥散。 怎样改善？非常感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有170人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- DNA琼脂糖电泳该注意哪些问题？
已经有10人回复
- 琼脂糖凝胶电泳结果
已经有6人回复
- SCoT标记的PCR产物的琼脂糖电泳图
已经有7人回复
- 看看这个琼脂糖电泳图 到底什么问题
已经有24人回复
- 琼脂糖凝胶电泳图分析
已经有40人回复
- 琼脂糖凝胶电泳图分析
已经有11人回复
- 琼脂糖凝胶电泳，跑的条带有点难看
已经有15人回复
- RNA非变性琼脂糖电泳
已经有26人回复
- 【求助/交流】PCR产物的琼脂糖电泳图片
已经有27人回复
- 【求助/交流】关于琼脂糖凝胶电泳
已经有20人回复
- 【求助】琼脂糖凝胶电泳图
已经有3人回复
- 【求助/交流】电泳图谱
已经有9人回复
shengwufenzi
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 464.5
- 红花: 1
- 帖子: 505
- 在线: 161.2小时
- 虫号: 993723
- 注册: 2010-04-10
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2010-04-26 21:19:11
shengwufenzi
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 464.5
- 红花: 1
- 帖子: 505
- 在线: 161.2小时
- 虫号: 993723
- 注册: 2010-04-10
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2010-04-26 21:24:43
fxy0570
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1695.1
- 散金: 20
- 红花: 4
- 帖子: 350
- 在线: 289.7小时
- 虫号: 720122
- 注册: 2009-03-11
- 性别: MM
- 专业: 生物技术药物
4楼2010-04-26 21:42:07
wwllkkhh
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 651.4
- 散金: 180
- 帖子: 264
- 在线: 103.7小时
- 虫号: 852905
- 注册: 2009-09-21
- 性别: GG
- 专业: 病原真菌学
5楼2010-04-26 21:46:16
liyong1981 
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 774.1
- 散金: 116
- 帖子: 905
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 357405
- 注册: 2007-04-27
- 性别: GG
- 专业: antibody
cpn(金币+2):其实我也怀疑是染料的问题，我们实验室不止我，没人跑出好看的条带。但其它实验室用EB跑出来的就很好。 2010-04-27 15:51
cpn(金币+5):确实是用的genefinder染料的问题，加在胶里跑似乎对胶的影响很大，改用预染后上样，效果就改善很多了，不过条带亮度就暗了不少，marker里最大的片段似乎有点轻微的弥散。 2010-05-01 21:14
cpn: 回帖置顶 2012-08-13 15:07:47
cpn(金币+5):确实是用的genefinder染料的问题，加在胶里跑似乎对胶的影响很大，改用预染后上样，效果就改善很多了，不过条带亮度就暗了不少，marker里最大的片段似乎有点轻微的弥散。 2010-05-01 21:14
cpn: 回帖置顶 2012-08-13 15:07:47
| 我估计很有可能是染料的问题，我以前也用过什么花青素之类的，跑出来很难看，怀疑了很多，最后用EB，一切正常了，所以说，还是EB好，其他的像sybergreen,也还好，就是很贵，其实也有毒。 |
6楼2010-04-27 08:56:17
7楼2010-04-27 16:30:03
poog502
木虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 2810.4
- 散金: 1115
- 红花: 8
- 帖子: 953
- 在线: 493.3小时
- 虫号: 723755
- 注册: 2009-03-16
- 专业: 果树学
cpn(金币+1):biorad的电泳仪，电流我只是设了个上限不让它超过而已，但是它自己确实是会慢慢增大的。我们这有个专门做核酸的实验室，他们跑跟我一样条件，只有染料不一样的情况下，电流也是有100多mA。琼脂糖的浓度感觉应该不是主要问题，浓度太低会造成弥散么？ 2010-04-27 19:43
|
1、首先是恒压电泳，没听说变压跑电泳的。 2、其次是电流恒定，100伏电压要用到110mA的电流吗？电流太高了... 通常用120V，50mA足够（当然是根据胶、电泳槽等大小而适当调整）。 3、染料的话，当然还是EB好，不过致癌的。其他染料也行，比如我们现在用GELRED，中文是荧光泰，跑电泳效果也不错，据说没毒，不过价格对得起人。 4、胶的浓度有点小了，偶们通常用1%琼脂糖。根据你的片段大小做调整。 [ Last edited by poog502 on 2010-4-27 at 16:41 ] |
8楼2010-04-27 16:38:23
9楼2010-04-27 16:53:39
lyg7720349
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 75.2
- 帖子: 145
- 在线: 9小时
- 虫号: 941449
- 注册: 2010-01-12
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
10楼2010-04-27 18:41:35
