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cpn

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】难看的琼脂糖电泳谱图 已有8人参与

最近跑的琼脂糖电泳谱图奇丑无比。

用的别人的1*TAE,0.7%Agarose,100V恒压跑半个小时(电流从110mA增大到最后140mA)。
染料是一个国产的牌子,Genefinder,预加在胶里的。
琼脂糖用的biowest。
图上两个条带都是marker,最右边是1kb的marker,往左是hind III lambda DNA marker(Takara的)。
条带都有不同程度拖尾变形,1kb marker的条带看上去还有些弥散。
怎样改善?非常感谢!
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lyg7720349

铜虫 (小有名气)

cpn(金币+1):那个有点歪的条带,我怀疑有可能是我当时上样没上好,去用其他课题组的电泳仪跑的,但是我不明白的是为什么会弥散。而且除了marker以外的泳道都是没有上样的,却有一条白色的亮带,感觉像是染料也跑下来了。 2010-04-27 19:35
感觉是胶的问题,胶各部分浓度不同造成移动的速率不同
望大家都各有所获!
10楼2010-04-27 18:41:35
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)


1949stone(金币+1): 2010-04-26 21:48
cpn(金币+1):那如果条带都扭曲掉像蚯蚓一样呢?会不会也是电源的问题? 2010-04-26 22:08
哈哈,你的电压不稳啊,时高时低,就会出现带跑歪的。并且电压太高时就会出现你图中的smear
2楼2010-04-26 21:19:11
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)


1949stone(金币+1): 2010-04-26 21:48
cpn(金币+1):是用恒流跑么?电压是不变的,但电流一直增大。 2010-04-26 22:03
至于你的电泳材料一般不会有太大问题的,你现在的关键是把电压(100v)及电流稳住,你的带就会很清晰了,不信你就试试吧,呵呵
3楼2010-04-26 21:24:43
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fxy0570

金虫 (正式写手)


1949stone(金币+1): 2010-04-26 21:49
cpn(金币+1):谢谢!我明天试看看 2010-04-26 22:07
电压不要太高,还有要稳定,我们一般就跑80V的就行了。
4楼2010-04-26 21:42:07
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