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xpb2005

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】各位虫友帮我分析PCR图片 已有29人参与





为什么我P完后一跑胶就成这种结果，是不是什么加多了，请大家分析分析。我的体系是：双蒸水15.7  ，10XBUFFER   2.5，DNTP  2.0，镁离子2.0，引物各1，酶0.3，模板0.5，总体系是25微升。我用这个体系前两天做出来了，别人用这个体系也出条带了，但第三天做出来就成这结果了。而且以前做出的现在也不出了，我跑胶时百分之2.0的胶，90伏跑50分钟。
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1楼 2010-04-24 10:31:52
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六妖妖

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-04-30 10:26
楼上很多同志都说你的模板质量有问题了。PCR抑制剂过多吧。不知道你是用什么方法提取的。换个提取方式试试会不会有所改变。对提取过程中的试剂配制会不会带入太多的杂质。
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24楼2010-04-29 16:00:12
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六妖妖

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-01 22:11
引用回帖:
Originally posted by xpb2005 at 2010-04-30 15:46:41:

我是用CTAB法提的小麦叶片的基因组DNA，还有就是我这是转基因植株

用酒精再洗几次试试。或者重复一下氯仿－异戊醇抽提除去蛋白质再用酒精洗干净。
赞一下(2人) 回复此楼
34楼2010-05-01 13:47:08
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