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xpb2005

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 548
红花: 1
帖子: 254
在线: 68小时
虫号: 985644
注册: 2010-03-30
专业: 植物生理与生化

[交流] 【求助/交流】各位虫友帮我分析PCR图片已有29人参与

为什么我P完后一跑胶就成这种结果，是不是什么加多了，请大家分析分析。我的体系是：双蒸水15.7 ，10XBUFFER 2.5，DNTP 2.0，镁离子2.0，引物各1，酶0.3，模板0.5，总体系是25微升。我用这个体系前两天做出来了，别人用这个体系也出条带了，但第三天做出来就成这结果了。而且以前做出的现在也不出了，我跑胶时百分之2.0的胶，90伏跑50分钟。

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1楼 2010-04-24 10:31:52

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honjie

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 8465.7
红花: 1
帖子: 605
在线: 45.8小时
虫号: 44335
注册: 2004-04-24
性别: GG
专业: 传染病媒介生物

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

把模板（估计你提的是gDNA吧）做倍比稀释，然后跑模板浓度梯度试试看，举个例子，我曾用单蚊提过gDNA，然后50ul溶解，再稀释10000倍，取5ul为模板进行PCR，一样可以扩增出条带的。

赞一下(1人)

29楼2010-04-30 15:51:28

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