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liuwei78

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 126
散金: 45
帖子: 79
在线: 9.9小时
虫号: 721671
注册: 2009-03-13
专业: 食品科学基础

[交流] 【求助/交流】菌液PCR和酶切的结果不符已有11人参与

我实验用到的载体片段长3000多，目的基因片段长2000多。导入大肠杆菌后菌液PCR得到的条带和预期一致，但是单酶切以后得到的条带却只有2000多bp。已经检查过了片段上应该只有一个酶切位点，那么为啥会出现这种情况呢

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1楼 2010-04-22 11:13:24

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jlzkchong

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 31.9
帖子: 25
在线: 3.5小时
虫号: 851069
注册: 2009-09-18
专业: 生化与分子生物

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

有可能你的目的片段在前期PCR的时候就出现了突变，酶切位点与原来不一样了，建议用高保真的酶重新做PCR，回收产物连载体~

赞一下(1人)

7楼2010-04-22 20:28:52

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