应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » [求助]原核表达如何减少包涵体
241/3返回列表123下一页
查看: 4200  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] [求助]原核表达如何减少包涵体 已有7人参与

我构建了基因工程菌（E.coli BL21(DE3)),经IPTG诱导，表达的目的蛋白几乎全部为包涵体，诱导温度已经降到了16度，真的不知道该怎么做了！请各位有经验的虫友帮帮那个忙，谢谢

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-13 at 10:24 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2009-07-13 10:19:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)
融合表达
回复此楼
2楼2009-07-13 10:31:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流! 7-13 21:00
不用IPTG诱导，加少量乳糖，在10-16℃ 诱导2-3天。
没有别的办法了。
赞一下(10人) 回复此楼
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2009-07-13 10:35:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞侠8683

新虫 (小有名气)
换一个表达载体
回复此楼
4楼2009-07-13 11:00:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

金虫鸣晓

铜虫 (小有名气)
加融合标签吧，或者在酵母中表达
赞一下 回复此楼
5楼2009-07-13 12:50:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lsbrc

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先分析你的蛋白，是否有二硫键等，有些蛋白是不适合在原核表达

也可试试MBP、NusA、Trx等促溶标签进行融合表达。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2009-07-13 12:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peng5053

银虫 (正式写手)

Dr.
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要是可以的话，你选择用自诱导培养基试试，也许会有点效果！
赞一下(1人) 回复此楼
多点思维，多点idea
7楼2009-07-13 14:23:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x8q4h11

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2009-7-13 10:35:
不用IPTG诱导，加少量乳糖，在10-16℃ 诱导2-3天。
没有别的办法了。

应该用多少乳糖呢？1mM吗？谢谢
赞一下 回复此楼
8楼2009-07-13 20:48:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x8q4h11

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 金虫鸣晓 at 2009-7-13 12:50:
加融合标签吧，或者在酵母中表达

不太懂“融合标签”，麻烦说详细一些，谢谢
赞一下 回复此楼
9楼2009-07-13 20:49:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxlian507

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你诱导的时间是多长？
原核表达的时间过长，很容易产生包涵体的。
你试着缩短时间看看，或者做个时间梯度看看。
赞一下(1人) 回复此楼
学习就是进步，知足就是幸福！
10楼2009-07-14 09:46:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 x8q4h11 的主题更新
241/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:47 by zNcEhTcH7ihq
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +6 两三岁ss 2026-09-14 6/300 2026-09-15 20:17 by 只吃肉葡萄
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:35 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:11 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-15 18:11 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:59 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:35 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 15:02 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 14:34 by VMDqgnlKimtZ
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 14:25 by VMDqgnlKimtZ
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:22 by VMDqgnlKimtZ
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:13 by VMDqgnlKimtZ
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-15 14:10 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-14 23:24 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭