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荧光定量pcr问题!求助
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荧光定量pcr问题!求助
准备做荧光定量pcr, 使用的从RNA反转录出的cDNA,RNA的浓度大小从40-200都有,在反转录成cDNA时未调整浓度,这样做荧光定量pcr是否有影响???有影响的话是否有补救方法呢?求助大神们
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2017-11-28 18:12:32
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Originally posted by
ahsoarli
at 2017-11-28 18:12:32
有影响,不知道你这是浓度高了还是低了?
一共十多个时间点的基因,想看他们的差异,每个点的基因有的高有的低。请问我现在知道反转录前对应RNA的浓度,需要想办法稀释cDNA吗?
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2017-11-28 19:10:45
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如果我做荧光pcr的时候也跑一个内参基因的话,可以改正这种没有调整相同浓度cDNA的错误吗?
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2017-11-28 20:23:26
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回忆专用瓜
at 2017-11-28 19:10:45
一共十多个时间点的基因,想看他们的差异,每个点的基因有的高有的低。请问我现在知道反转录前对应RNA的浓度,需要想办法稀释cDNA吗?
...
感觉对cdna定量后根据浓度上量比较好
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2017-11-28 20:47:14
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ahsoarli
at 2017-11-28 20:47:14
感觉对cdna定量后根据浓度上量比较好
...
好的,那我重新做一下。请问浓度调整在多少差距内比较好?
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2017-11-29 22:36:36
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这个要根据你试剂盒的说明了
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7楼
2017-11-29 22:51:15
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2017-11-30 09:00:54
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建议先用仪器检测一下浓度,然后列个表格,调整上样量。
好的 感谢!
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2017-12-02 00:30:56
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ahsoarli
at 2017-11-29 22:51:15
这个要根据你试剂盒的说明了
嗯嗯 感谢!!
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2017-12-02 00:31:13
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