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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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回忆专用瓜

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量pcr问题!求助

准备做荧光定量pcr, 使用的从RNA反转录出的cDNA,RNA的浓度大小从40-200都有,在反转录成cDNA时未调整浓度,这样做荧光定量pcr是否有影响???有影响的话是否有补救方法呢?求助大神们

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回忆专用瓜

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ahsoarli at 2017-11-28 18:12:32
有影响,不知道你这是浓度高了还是低了?

一共十多个时间点的基因,想看他们的差异,每个点的基因有的高有的低。请问我现在知道反转录前对应RNA的浓度,需要想办法稀释cDNA吗?

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3楼2017-11-28 19:10:45
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ahsoarli

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骑牛逛街

有影响,不知道你这是浓度高了还是低了?

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方而不割廉而不刿直而不肆光而不耀
2楼2017-11-28 18:12:32
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回忆专用瓜

新虫 (初入文坛)

如果我做荧光pcr的时候也跑一个内参基因的话,可以改正这种没有调整相同浓度cDNA的错误吗?

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4楼2017-11-28 20:23:26
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ahsoarli

捐助贵宾 (职业作家)

骑牛逛街

引用回帖:
3楼: Originally posted by 回忆专用瓜 at 2017-11-28 19:10:45
一共十多个时间点的基因,想看他们的差异,每个点的基因有的高有的低。请问我现在知道反转录前对应RNA的浓度,需要想办法稀释cDNA吗?
...

感觉对cdna定量后根据浓度上量比较好

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方而不割廉而不刿直而不肆光而不耀
5楼2017-11-28 20:47:14
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