24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 5027  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

rdc5190

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE 跑胶问题 已有1人参与

最近在跑电泳,统一上样蛋白量,想观察一下目的蛋白(18KD、190KD)左右在不同诱导期的表达情况,试下可不可行。跑出来的胶如下图1(彩色)、图2(灰色),发现大分子量的蛋白没有分开,小分子量的蛋白出现幻影。请问这是什么问题?该如何改进。
5%的浓缩胶  8%的分离胶   上样缓冲液是6X loading buffer   充分振荡,开水反应5min,离心。上样量10uL
电泳条件:80v 30min  120v 120min

SDS-PAGE 跑胶问题
1.jpg


SDS-PAGE 跑胶问题-1
2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gxx2lm

木虫 (正式写手)

建议选用梯度胶,要不然就把两个分子量的蛋白用不同浓度的胶分别跑

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-08-31 20:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

那半句誓言

金虫 (正式写手)

8%的胶大分子本来就分得不好啊 我们一般煮8-10分钟

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-08-31 19:58:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rdc5190

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 那半句誓言 at 2017-08-31 19:58:38
8%的胶大分子本来就分得不好啊 我们一般煮8-10分钟

大分子要用多少的胶才能分的好
4楼2017-08-31 20:51:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rdc5190

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gxx2lm at 2017-08-31 20:40:01
建议选用梯度胶,要不然就把两个分子量的蛋白用不同浓度的胶分别跑

这是我用12%跑出来的胶,小分子区域出现了很明显的拖带现象。总体很模糊
SDS-PAGE 跑胶问题-2
DC8.15(12%)A_副本.jpg

5楼2017-08-31 20:59:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +4 XQTJZ 2026-03-26 4/200 2026-03-27 01:23 by dgnhs
[考研] 287求调剂 +7 land xuxu 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:44 by wxiongid
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 化学308分求调剂 +5 你好明天你好 2026-03-23 5/250 2026-03-26 23:43 by 催化大白
[考研] 286求调剂 +3 lim0922 2026-03-26 3/150 2026-03-26 23:07 by 不吃魚的貓
[考研] 08工学调剂 +13 用户573181 2026-03-20 20/1000 2026-03-26 21:22 by 用户573181
[考研] 求调剂 +5 芦lty 2026-03-25 6/300 2026-03-26 20:49 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂推荐 +4 清酒714 2026-03-26 5/250 2026-03-26 17:49 by fmesaito
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +4 SYA! 2026-03-23 4/200 2026-03-26 15:27 by caiaijun80
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 321求调剂 +3 璞玉~~ 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:07 by Zhanglab-TJU
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
信息提示
请填处理意见