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努力奋进潇洒

金虫 (小有名气)

[交流] 同源重组载体构建

使用一步克隆法（同源重组）构建载体，经转化后能在氨苄培养皿长出上百个的菌落，菌落PCR结果显示有阳性，但是测序结果却一直不对。请各路大神指教。
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1楼2017-04-14 10:57:52
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吕葱葱同学

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
菌落PCR阳性不能说明什么问题，因为可能是假阳性。同源重组成功的基础是，你的重组片段纯度很好，浓度测量要准确，我一般在连接前会把各个片段再跑一次胶看看目的条带是否单一且亮，你得载体片段扩增下来后必须用DpnI消化载体质粒的模板，减少在板子上长出来的空质粒

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32楼2017-11-24 18:24:24
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jinnini125

木虫 (小有名气)
★
努力奋进潇洒(金币+1): 谢谢参与
测序结果怎么不对？

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5楼2017-04-14 13:23:52
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你在思念谁3楼
2017-04-14 11:21   回复  
努力奋进潇洒(金币+1): 谢谢参与
n 发自小木虫Android客户端
不闹眼子的我6楼
2017-04-14 13:40   回复  
努力奋进潇洒(金币+1): 谢谢参与
祝福 发自小木虫IOS客户端
也是小白7楼
2017-04-14 13:59   回复  
努力奋进潇洒(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
龙飞哥11楼
2017-04-14 14:27   回复  
努力奋进潇洒(金币+1): 谢谢参与
祝福 发自小木虫Android客户端
nono200912楼
2017-04-14 14:28   回复  
努力奋进潇洒(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
田园STYLE13楼
2017-04-14 14:29   回复  
努力奋进潇洒(金币+1): 谢谢参与
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xxl520zry14楼
2017-04-14 14:35   回复  
努力奋进潇洒(金币+1): 谢谢参与
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