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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因敲除打靶载体构建
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id万小怨

新虫 (初入文坛)

[交流] 基因敲除打靶载体构建 已有4人参与

问大家，同源重组敲掉一个1kb+的基因，上下游同源臂大约都为200kb+，合适吗，会不会太短了，求助啊
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1楼 2013-08-26 12:33:45
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dl19891023

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-26 18:42:18
是不是打错了，200kb？还是200bp？200bp的话是有点少了，同源双交换的概率会很低，我的是基因800bp，上下游同源臂一个是1000bp，一个是800bp，一般同源臂越长，概率越高。
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2楼2013-08-26 12:43:03
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-26 18:42:26
同源臂的长度会影响交换重组的效率，具体选多长要根据你做的宿主来，不同的宿主不太相同。
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3楼2013-08-26 15:01:59
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id万小怨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dl19891023 at 2013-08-26 12:43:03
是不是打错了，200kb？还是200bp？200bp的话是有点少了，同源双交换的概率会很低，我的是基因800bp，上下游同源臂一个是1000bp，一个是800bp，一般同源臂越长，概率越高。

确实打错了，200bp。。。
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4楼2013-08-26 21:01:47
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id万小怨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-26 15:01:59
同源臂的长度会影响交换重组的效率，具体选多长要根据你做的宿主来，不同的宿主不太相同。

宿主是细菌

[ Last edited by id万小怨 on 2013-8-26 at 21:27 ]
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5楼2013-08-26 21:02:52
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xikexiao

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
6楼2013-08-26 22:26:28
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by id万小怨 at 2013-08-26 21:02:52
宿主是细菌
...

200bp虽然不算是多，应该可以了。
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7楼2013-08-26 23:16:53
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id万小怨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-26 23:16:53
200bp虽然不算是多，应该可以了。...

希望是啊，已经做到这步了，先试试看吧，谢谢亲回复了~
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8楼2013-08-26 23:55:33
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xiaoyaoyou35

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
能问下同源臂设计在基因哪个位置吗？第一个exon的前后吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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9楼2014-04-25 11:16:35
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