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id万小怨

新虫 (初入文坛)

[交流] 基因敲除打靶载体构建已有4人参与

问大家,同源重组敲掉一个1kb+的基因,上下游同源臂大约都为200kb+,合适吗,会不会太短了,求助啊
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dl19891023

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-26 18:42:18
是不是打错了,200kb?还是200bp?200bp的话是有点少了,同源双交换的概率会很低,我的是基因800bp,上下游同源臂一个是1000bp,一个是800bp,一般同源臂越长,概率越高。
2楼2013-08-26 12:43:03
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-26 18:42:26
同源臂的长度会影响交换重组的效率,具体选多长要根据你做的宿主来,不同的宿主不太相同。
3楼2013-08-26 15:01:59
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id万小怨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dl19891023 at 2013-08-26 12:43:03
是不是打错了,200kb?还是200bp?200bp的话是有点少了,同源双交换的概率会很低,我的是基因800bp,上下游同源臂一个是1000bp,一个是800bp,一般同源臂越长,概率越高。

确实打错了,200bp。。。
4楼2013-08-26 21:01:47
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id万小怨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-26 15:01:59
同源臂的长度会影响交换重组的效率,具体选多长要根据你做的宿主来,不同的宿主不太相同。

宿主是细菌

[ Last edited by id万小怨 on 2013-8-26 at 21:27 ]
5楼2013-08-26 21:02:52
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xikexiao

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

6楼2013-08-26 22:26:28
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by id万小怨 at 2013-08-26 21:02:52
宿主是细菌
...

200bp虽然不算是多,应该可以了。
7楼2013-08-26 23:16:53
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id万小怨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-26 23:16:53
200bp虽然不算是多,应该可以了。...

希望是啊,已经做到这步了,先试试看吧,谢谢亲回复了~
8楼2013-08-26 23:55:33
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xiaoyaoyou35

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
能问下同源臂设计在基因哪个位置吗?第一个exon的前后吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2014-04-25 11:16:35
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