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yuriname

新虫 (小有名气)


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大肠杆菌转化后,挑的单菌落PCR,没有条带是真的没连上吗,我都做了好几次了
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最近一直在做DNA连接,挑取的单菌落摇完后,PCR,没有条带是真的没连上吗,是否有什么需要注意的问题,我的是单酶切

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九生123

新虫 (小有名气)


引用回帖:
22楼: Originally posted by 九生123 at 2017-03-13 08:13:51
单酶切容易载体自连,酶切後的载体需要去磷酸化,做了吗?

不然的话,绝大部分是空载体

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23楼2017-03-13 08:14:28
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九生123

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
单酶切容易载体自连,酶切後的载体需要去磷酸化,做了吗?

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22楼2017-03-13 08:13:51
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yuriname

新虫 (小有名气)


引用回帖:
22楼: Originally posted by 九生123 at 2017-03-13 08:13:51
单酶切容易载体自连,酶切後的载体需要去磷酸化,做了吗?

把质粒去磷酸化了

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24楼2017-03-14 17:15:34
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aaa20130201

铁虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能是假阳性,或者你pcr反应体系中量加的不合理,个人感觉双酶切好一些。
25楼2017-03-16 19:28:23
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你好先生121

铁虫 (小有名气)


26楼2017-05-04 00:23:29
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2017-03-13 07:43   回复  
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宝云络3楼
2017-03-13 07:43   回复  
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lhsyfh11楼
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幽安妮12楼
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杨天山13楼
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cuijg14楼
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hit072516楼
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YIMO1118楼
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hechuncan19楼
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Shenheidan21楼
2017-03-13 07:44   回复  
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