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海燕0925

新虫 (初入文坛)

[求助] 挑大肠杆菌单菌落在LB液体培养基中培养后,菌体呈颗粒状悬浮在培养基中,怎么回事呢?

载体和PCR产物连接转化到大肠杆菌后,挑取转化子在LB液体培养基中培养一段时间后,菌体以颗粒状悬浮在培养基中,培养液仍澄清,请问为什么会出现这样的现象?怎么解决呢?希望大家给点建议,非常感谢!
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skpom

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励热心应助! 2013-09-12 10:52:01
根据你描述的情况可能有几种原因:
1、你把整个菌落都挑下来,而且还带有大量培养基,
因为菌团在培养基上,随着琼脂悬浮在培养基中,而在菌液中的量很少,生长缓慢或几乎不生长,
建议每过一段时间摇一摇三角瓶,让菌落尽量散开
2、平板被污染,所挑的菌落是杂菌,这就需要选择正确的阳性克隆重新接种,
注意培养基要灭菌彻底。
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2楼2013-09-10 10:00:22
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海燕0925

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by skpom at 2013-09-10 10:00:22
根据你描述的情况可能有几种原因:
1、你把整个菌落都挑下来,而且还带有大量培养基,
因为菌团在培养基上,随着琼脂悬浮在培养基中,而在菌液中的量很少,生长缓慢或几乎不生长,
建议每过一段时间摇一摇三角瓶 ...

谢谢您!我的实验现象可能是由于你说的第一种原因,对于平板上的转化子,首先我做了菌落PCR,确认为阳性转化子后,我又挑取相应的残余菌落进行了扩大培养,此间可能挑取了少量的琼脂块。我再试几次,之后再跟您交流吧
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3楼2013-09-11 08:56:09
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