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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 挑大肠杆菌单菌落在LB液体培养基中培养后，菌体呈颗粒状悬浮在培养基中，怎么回事呢？
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海燕0925

新虫 (初入文坛)

[求助] 挑大肠杆菌单菌落在LB液体培养基中培养后，菌体呈颗粒状悬浮在培养基中，怎么回事呢？

载体和PCR产物连接转化到大肠杆菌后，挑取转化子在LB液体培养基中培养一段时间后，菌体以颗粒状悬浮在培养基中，培养液仍澄清，请问为什么会出现这样的现象？怎么解决呢？希望大家给点建议，非常感谢！
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知识共享，共同成长
1楼 2013-09-09 11:11:46
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skpom

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励热心应助！ 2013-09-12 10:52:01
根据你描述的情况可能有几种原因：
1、你把整个菌落都挑下来，而且还带有大量培养基，
因为菌团在培养基上，随着琼脂悬浮在培养基中，而在菌液中的量很少，生长缓慢或几乎不生长，
建议每过一段时间摇一摇三角瓶，让菌落尽量散开
2、平板被污染，所挑的菌落是杂菌，这就需要选择正确的阳性克隆重新接种，
注意培养基要灭菌彻底。
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携手共创科技论坛
2楼2013-09-10 10:00:22
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海燕0925

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by skpom at 2013-09-10 10:00:22
根据你描述的情况可能有几种原因：
1、你把整个菌落都挑下来，而且还带有大量培养基，
因为菌团在培养基上，随着琼脂悬浮在培养基中，而在菌液中的量很少，生长缓慢或几乎不生长，
建议每过一段时间摇一摇三角瓶 ...

谢谢您！我的实验现象可能是由于你说的第一种原因，对于平板上的转化子，首先我做了菌落PCR，确认为阳性转化子后，我又挑取相应的残余菌落进行了扩大培养，此间可能挑取了少量的琼脂块。我再试几次，之后再跟您交流吧
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知识共享，共同成长
3楼2013-09-11 08:56:09
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