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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

[求助] 求助!!蛋白电泳条带定量!!! 已有1人参与

所做的是某种菌的全菌蛋白电泳,现在我想要对我的目的蛋白进行定量,请问除了灰度扫描还有什么别的方法吗?
因为灰度扫描对于全菌蛋白来说实在太不准确了……

求问大神们!!还有没有更好的定量方法?

附上我的电泳图如下:是多肽蛋白SDS-PAGE,就是那种三层胶的  不是普通的SDS-PAGE;目的蛋白大小约为11 kda

求助!!蛋白电泳条带定量!!!
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

2楼2016-10-31 15:50:09
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

3楼2016-10-31 17:09:55
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choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

这么乱,怎么定位。用彩色荧光抗体试试。在不同波长下发光

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-11-01 00:53:11
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by choujiaoqi at 2016-11-01 00:53:11
这么乱,怎么定位。用彩色荧光抗体试试。在不同波长下发光

是啊  全菌蛋白条带就是很多很乱

买抗体以及其他试剂啥的就不要想了…………公司很抠  不会给买
5楼2016-11-01 08:39:00
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

求大神
6楼2016-11-01 14:47:35
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

把样品重新处理,上样量降低,

发自小木虫Android客户端
I am not a hero , but I served with heroes!
7楼2016-11-02 02:19:48
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
十四_14: 金币+50, ★有帮助 2016-11-02 17:21:12
最好还是先做一些初步纯化吧!就你这个样子的样品,就算定量了,也没有意义的!
8楼2016-11-02 16:22:59
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yxncas-2012 at 2016-11-02 16:22:59
最好还是先做一些初步纯化吧!就你这个样子的样品,就算定量了,也没有意义的!

我也觉得意义不大  因为首先对目的条带在全菌中的定量就不准确,其次样品状态、电泳状态各方面都会影响定量结果

可是…………老板就非要定量……我也是醉了
9楼2016-11-02 17:21:16
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wlt728 at 2016-11-02 02:19:48
把样品重新处理,上样量降低,

恩恩  优化一下电泳让条带清晰点

但是还是没有找到合适的定量方法呀
10楼2016-11-02 17:22:02
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