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phyllisguo

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[交流] 【求助/交流】关于等电聚焦电泳问题，不甚感激！！已有4人参与

最近用伯乐111型等电聚焦电泳槽做IEF实验，想测试一下蛋白的等电点
可是几次实验，标准蛋白（pH3-10）的条带总是不能全部出现，只出现最明显的三条，其余的七八条都出不来，真是郁闷死了！

胶的配制和实验步骤我都是按111型IEF槽的说明来做的，
有没有虫子做过这方面的实验，可否给点建议，真是不甚感激呀

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1楼 2010-12-03 09:46:11

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taotao4108

金虫 (正式写手)

无理

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):鼓励交流，欢迎常来 2010-12-03 15:43:07

伯乐的等电聚焦我用过，不过是双向电泳的IEF，我用的都是伯乐的成品胶条。看楼主的意思，似乎IPG胶条是自己做的啊，很厉害！就我分析，如果你的胶条做的没有问题的话，应该是上样量和水化时间的问题，不知道你所用的111型等电聚焦电泳槽有没有主动水化和被动水化之分，如果有建议两种都试一下，然后再调整一下上样量。等电聚焦这种实验比较麻烦，影响因素也很多，建议多分析，多调整protocol，祝成功。

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2楼2010-12-03 14:13:15

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phyllisguo

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谢谢

引用回帖:

Originally posted by taotao4108 at 2010-12-03 14:13:15:
伯乐的等电聚焦我用过，不过是双向电泳的IEF，我用的都是伯乐的成品胶条。看楼主的意思，似乎IPG胶条是自己做的啊，很厉害！就我分析，如果你的胶条做的没有问题的话，应该是上样量和水化时间的问题，不知道你所用 ...

谢谢啊，可是我那个貌似没有什么主动水化被动水化呢，呃，也不需要什么缓冲液

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3楼2010-12-03 15:40:41

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