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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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situ000

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE的Marker条带问题 已有2人参与

跑了好多次SDS都不好，所以来求助，希望大神帮助
如图是其中一次，有六个条带，其他都还好，就是第一条Marker就是很淡，而且只能隐约看到三条的样子，但是这个Marker原本有七个条带
后来我换了两种Marker，也是差不多的情况，就是淡而且跑不全，本来是加5微升，后来加到10,15微升都还是差不多
而且最近我同学去跑，她说分离胶都一直不凝固，不知道什么问题

SDS-PAGE的Marker条带问题
FullSizeRender(1).jpg
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1楼 2016-10-26 18:12:51
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goodluck7111

专家顾问 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-27 20:56:23
已经毕业很多年了  希望我的回答可以帮到你
1.Marker分离不完全可能和配制的分离胶浓度有关，不同浓度的分离胶，分离范围是不一样的，这个可以在网上查到；
2.确定marker的购买厂家，有些厂家的不是很好，另：请仔细阅读marker说明书，上面一般都会说明分离胶的浓度加样体积等信息；
3.一般马克的浓度5微升即可；
4.至于胶不凝固，我记得好像是TEMED的原因，好像这个玩意是必须放在冰箱而且避光保存，（印象中是这样，如果有错误，请指正，莫怪，毕竟已经毕业6年了 哈哈）
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坚持坚持
2楼2016-10-26 18:40:21
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匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-10-30 21:49:59
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7楼2016-10-27 23:32:25
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蔡慧

银虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-30 21:50:15
个人觉得胶本身应该没有多大问题，应该是脱色不完全，背景太高或者是染色液能力不够~~~至于胶为什么没凝固，在排除体系问题的前提下，配胶要注意各种试剂所加量的单位，并且要充分混匀~~~祝好运~~~

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加油
8楼2016-10-28 00:29:23
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普通回帖

匿名

用户注销 (初入文坛)
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3楼2016-10-26 18:56:12
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chen5805

至尊木虫 (职业作家)

资深木虫
我一般加10-15ul marker,你可以试着脱色时间长一些，看看什么情况

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4楼2016-10-27 21:02:14
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chen5805

至尊木虫 (职业作家)

资深木虫
其他条带清晰度也不是很高，估计有其他什么原因

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5楼2016-10-27 21:04:00
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minecat

木虫 (初入文坛)
Marker是否室温长时间放置的？降解了吧，重新配制，分装，-20℃保存。

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6楼2016-10-27 21:24:16
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宝儿ZN

铁虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-30 21:50:34
边缘效应比较明显，胶凝固时不均匀，建议空出第一个泳道

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做最好的自己
9楼2016-10-28 22:38:58
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)

疯子
买新的试剂，用双蒸水配制。

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开开心心做科研，踏踏实实做好人。
10楼2016-10-30 17:49:50
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