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situ000

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE的Marker条带问题 已有2人参与

跑了好多次SDS都不好,所以来求助,希望大神帮助
如图是其中一次,有六个条带,其他都还好,就是第一条Marker就是很淡,而且只能隐约看到三条的样子,但是这个Marker原本有七个条带
后来我换了两种Marker,也是差不多的情况,就是淡而且跑不全,本来是加5微升,后来加到10,15微升都还是差不多
而且最近我同学去跑,她说分离胶都一直不凝固,不知道什么问题

SDS-PAGE的Marker条带问题
FullSizeRender(1).jpg
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goodluck7111

专家顾问 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-27 20:56:23
已经毕业很多年了  希望我的回答可以帮到你
1.Marker分离不完全可能和配制的分离胶浓度有关,不同浓度的分离胶,分离范围是不一样的,这个可以在网上查到;
2.确定marker的购买厂家,有些厂家的不是很好,另:请仔细阅读marker说明书,上面一般都会说明分离胶的浓度加样体积等信息;
3.一般马克的浓度5微升即可;
4.至于胶不凝固,我记得好像是TEMED的原因,好像这个玩意是必须放在冰箱而且避光保存,(印象中是这样,如果有错误,请指正,莫怪,毕竟已经毕业6年了 哈哈)
坚持坚持
2楼2016-10-26 18:40:21
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匿名

用户注销 (正式写手)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-10-30 21:49:59
本帖仅楼主可见
7楼2016-10-27 23:32:25
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蔡慧

银虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-30 21:50:15
个人觉得胶本身应该没有多大问题,应该是脱色不完全,背景太高或者是染色液能力不够~~~至于胶为什么没凝固,在排除体系问题的前提下,配胶要注意各种试剂所加量的单位,并且要充分混匀~~~祝好运~~~

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加油
8楼2016-10-28 00:29:23
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普通回帖

匿名

用户注销 (初入文坛)

本帖仅楼主可见
3楼2016-10-26 18:56:12
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chen5805

至尊木虫 (职业作家)

资深木虫

我一般加10-15ul marker,你可以试着脱色时间长一些,看看什么情况

发自小木虫Android客户端
4楼2016-10-27 21:02:14
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chen5805

至尊木虫 (职业作家)

资深木虫

其他条带清晰度也不是很高,估计有其他什么原因

发自小木虫Android客户端
5楼2016-10-27 21:04:00
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minecat

木虫 (初入文坛)

Marker是否室温长时间放置的?降解了吧,重新配制,分装,-20℃保存。

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6楼2016-10-27 21:24:16
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宝儿ZN

铁虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-30 21:50:34
边缘效应比较明显,胶凝固时不均匀,建议空出第一个泳道

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做最好的自己
9楼2016-10-28 22:38:58
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)

疯子

买新的试剂,用双蒸水配制。

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开开心心做科研,踏踏实实做好人。
10楼2016-10-30 17:49:50
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