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smaileon新虫 (小有名气)
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sds-page电泳marker的条带不能完全跑出来，有什么原因。 已有6人参与
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国庆到现在跑了好多次电泳，marker明明有七条带的，只能跑出六条。跑了几次都是六条条带，一开始以为跑的不够长，后面都跑到溴酚蓝都快出来了，还是六条，觉得心酸。 然后就把marker再取一点出来拿去煮和离心后再点样，结果更少了，也更不清楚了。 会是Ph的问题吗？还是marker的问题，用了一年多了。 我在做重组的酵母菌（黑曲酶碱性蛋白酶）的酶活性质优化。 一点都不顺畅，好心塞。 发自小木虫Android客户端 |
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8楼2015-10-19 13:27:26
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增加电压或延长保留时间，看看别人是否一样的结果。marker是否用错 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2015-10-17 08:23:25
jjf139
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电泳条件看看是否合适，建议看看你的marker有无降解。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2015-10-17 08:33:31
smaileon
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怎么看marker蛋白质是否有降解？ 一般都有保存在负20度冰箱的。 平时电泳用80v把它们压一段时间，想把它们压成一条线，但是压不成，都是两层的感觉。也很奇怪。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-10-17 08:42:18
smaileon
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现在用的是80v压，100v跑分离胶，一般都是跑一个多小时，估计那块胶就十厘米这样。。 我怕电压大了，时间就短了，大的还没来得及分离，小的已经跑出去了。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2015-10-17 08:45:34
6楼2015-10-19 11:17:15
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【答案】应助回帖
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smaileon: 金币+2, ★★★很有帮助, 现在12%的胶都是跑到还剩1cm 2015-10-25 21:02:52
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| 12%以上的胶，当你的溴酚蓝那条线离板底0.5cm左右就停止电泳的话，Maker都是能跑出7条带的，当然前提是你的胶浓度是准确的。而15%的胶一般溴酚蓝跑出板底也基本能跑出7条带，因为好几次忙不过来，跑电泳的时候忘记了，经常会出现这种情况，但是经过长期实验，发现没有问题。同时，若您的胶浓度只有10%或者7%甚至更低的话，根据我的经验，10%浓度的胶要在离板底2cm左右的时候停止电泳，7%的胶需要更早，差不多3cm左右吧。 |
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