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smaileon

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[求助] sds-page电泳marker的条带不能完全跑出来，有什么原因。已有6人参与

国庆到现在跑了好多次电泳，marker明明有七条带的，只能跑出六条。跑了几次都是六条条带，一开始以为跑的不够长，后面都跑到溴酚蓝都快出来了，还是六条，觉得心酸。
然后就把marker再取一点出来拿去煮和离心后再点样，结果更少了，也更不清楚了。
会是Ph的问题吗？还是marker的问题，用了一年多了。
我在做重组的酵母菌（黑曲酶碱性蛋白酶）的酶活性质优化。
一点都不顺畅，好心塞。

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1楼2015-10-17 08:19:32

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1203125603

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【答案】应助回帖

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smaileon: 金币+2, ★★★很有帮助, 现在12%的胶都是跑到还剩1cm 2015-10-25 21:02:52
youlinglyw: 金币+8, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩 2015-10-27 10:08:53

12%以上的胶，当你的溴酚蓝那条线离板底0.5cm左右就停止电泳的话，Maker都是能跑出7条带的，当然前提是你的胶浓度是准确的。而15%的胶一般溴酚蓝跑出板底也基本能跑出7条带，因为好几次忙不过来，跑电泳的时候忘记了，经常会出现这种情况，但是经过长期实验，发现没有问题。同时，若您的胶浓度只有10%或者7%甚至更低的话，根据我的经验，10%浓度的胶要在离板底2cm左右的时候停止电泳，7%的胶需要更早，差不多3cm左右吧。