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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » sds-page电泳marker的条带不能完全跑出来，有什么原因。
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smaileon

新虫 (小有名气)

[求助] sds-page电泳marker的条带不能完全跑出来，有什么原因。已有6人参与

国庆到现在跑了好多次电泳，marker明明有七条带的，只能跑出六条。跑了几次都是六条条带，一开始以为跑的不够长，后面都跑到溴酚蓝都快出来了，还是六条，觉得心酸。
然后就把marker再取一点出来拿去煮和离心后再点样，结果更少了，也更不清楚了。
会是Ph的问题吗？还是marker的问题，用了一年多了。
我在做重组的酵母菌（黑曲酶碱性蛋白酶）的酶活性质优化。
一点都不顺畅，好心塞。

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1楼2015-10-17 08:19:32
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jjf139

金虫 (著名写手)

新药研发&药物分析
★ ★
smaileon(youlinglyw代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩 2015-10-27 10:08:37
电泳条件看看是否合适，建议看看你的marker有无降解。

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3楼2015-10-17 08:33:31
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weandyouzhy

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩 2015-10-27 10:08:22
增加电压或延长保留时间，看看别人是否一样的结果。marker是否用错

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everything*will*be*OK！so*never*give*up,man!
2楼2015-10-17 08:23:25
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smaileon

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jjf139 at 2015-10-17 08:33:31
电泳条件看看是否合适，建议看看你的marker有无降解。

怎么看marker蛋白质是否有降解？
一般都有保存在负20度冰箱的。

平时电泳用80v把它们压一段时间，想把它们压成一条线，但是压不成，都是两层的感觉。也很奇怪。

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4楼2015-10-17 08:42:18
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smaileon

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by weandyouzhy at 2015-10-17 08:23:25
增加电压或延长保留时间，看看别人是否一样的结果。marker是否用错

现在用的是80v压，100v跑分离胶，一般都是跑一个多小时，估计那块胶就十厘米这样。。

我怕电压大了，时间就短了，大的还没来得及分离，小的已经跑出去了。

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5楼2015-10-17 08:45:34
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