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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 求解有关SDS-PAGE凝胶电泳染色脱色问题，感激不尽。
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LittleQ_906

铁虫 (小有名气)

[求助] 求解有关SDS-PAGE凝胶电泳染色脱色问题，感激不尽。 已有2人参与

我是大二的生物工程专业的一名学生，如图示，是我最近对一株酵母体内蛋白提取物凝胶柱层析后得到的三个峰样品，分别加样同时通过电泳得到的分离胶部分，经过染色以及反复脱色后，在下方出现了如图箭头所指的细的染色线（分离胶是一整块的，没有梯度差异），之前也跑过一次胶，也出现过这种情况，想问下到底是什么原因阿？？。还有，想请教一下，每个样品跑出的条带自上而下宽度不统一（比如说左边的marker，越来越宽）正常吗？？原因是什么阿？？请各位论坛的大牛学者们指点迷津，不胜感激，幸甚至哉阿，谢谢啦O(∩_∩)O~

求解有关SDS-PAGE凝胶电泳染色脱色问题，感激不尽。
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1楼 2014-06-26 20:55:35
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yuyelin

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1. 你那条线其实我跑过很多胶也出现过，也不确定是什么原因，估计有可能是配胶的溶液或者缓冲液里面有杂质。不过只要不影响实验结果就好。
2. 你的Marker越来越宽是因为你的Marker的离子浓度跟你样品离子浓度不一样，导致泳道电流不同，所以会有横向扩散。
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若嗔若痴，不见风云
2楼2014-06-27 15:10:50
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yinchaomin

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
依照我的经验来看，很有可能是点样时点的太多，样品铺在分隔胶孔的胶上，导致出现了直线，Marker越来越宽，可能是温度过高，电流不稳导致的
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3楼2014-06-29 10:45:41
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