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18716248350新虫 (小有名气)
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pet28a表达引物设计问题 已有1人参与
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| 想研究一个蛋白的功能和性质，用pet28a表达，引物设计时目的基因要不要加入起始密码子和终止密码子，选择的是hindIII和EcoR I这两个酶切位点 |
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2楼2016-07-17 14:01:54
18716248350
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3楼2016-07-17 14:48:26
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- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
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可以直接用NdeI或NcoI位点中的ATG作为起始密码子，如果是前者应该加上终止密码子，his标签在蛋白N端；如果是后者的话不需要终止密码子，标签在C端。建议使用前者，N端标签对蛋白构象影响较小。如果想用其他酶切位点的话，无法避免引入多余氨基酸，而且必须添加终止密码子和起始密码子！ 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2016-07-21 22:11:00