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pet28a表达引物设计问题
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专业: 预防医学其他科学问题
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pet28a表达引物设计问题
已有1人参与
想研究一个蛋白的功能和性质,用pet28a表达,引物设计时目的基因要不要加入起始密码子和终止密码子,选择的是hindIII和EcoR I这两个酶切位点
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【求助/交流】质粒载体 引物设计
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2016-07-17 12:21:57
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2016-07-19 15:32:13
你的标签在N端的话就要加终止密码子
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2楼
2016-07-17 14:01:54
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引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
6827089
at 2016-07-17 14:01:54
你的标签在N端的话就要加终止密码子
pet28a在两端都有标签,是不是只要一个标签就行了
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3楼
2016-07-17 14:48:26
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【答案】应助回帖
可以直接用NdeI或NcoI位点中的ATG作为起始密码子,如果是前者应该加上终止密码子,his标签在蛋白N端;如果是后者的话不需要终止密码子,标签在C端。建议使用前者,N端标签对蛋白构象影响较小。如果想用其他酶切位点的话,无法避免引入多余氨基酸,而且必须添加终止密码子和起始密码子!
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4楼
2016-07-21 22:11:00
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