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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » PCR验证正确，酶切没有目的片段
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hnnydx

木虫 (著名写手)

[交流] PCR验证正确，酶切没有目的片段 已有16人参与

构建的重组载体，PCR验证正确，单双酶切不开，没有切出目的片段

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1楼 2016-07-14 11:55:22
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sayen

银虫 (小有名气)
★
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pcr鉴定需要一个载体上的引物一个插入片段的引物，否则会有假阳性

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10楼2016-07-15 21:18:35
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普通回帖

star013

新虫 (知名作家)
这个不应该的

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2楼2016-07-14 12:02:45
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化蝶为谁舞

新虫 (初入文坛)
★
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我最近也是遇到这样的问题，

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3楼2016-07-14 13:54:19
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sun308686107

新虫 (初入文坛)
★
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测序看看是否正确呗
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4楼2016-07-14 14:32:11
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darlingbear

新虫 (小有名气)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-16 07:53:22
xn8008: 应助指数+1 2016-07-16 09:26:21
有些限制性内切酶是对甲基化敏感的，可以考虑一下这方面

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5楼2016-07-14 15:03:46
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jie123400

铜虫 (小有名气)
★
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还是要测序看一下酶切位点在不在
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6楼2016-07-14 16:54:53
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守望海贝

捐助贵宾 (小有名气)
★
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测序看下酶切位点和目的序列对不对
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7楼2016-07-15 09:09:42
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不爱做实验

银虫 (正式写手)
★
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换片段内部的其他位点去切，一般是没问题的
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8楼2016-07-15 09:42:46
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曼陀罗的祈祷

金虫 (正式写手)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-16 07:53:44
xn8008: 应助指数+1 2016-07-16 09:26:28
你的酶切体系，你的酶没问题的话，可以检查一下酶切位点是不是加上去了，或者是不是单酶切？
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想做个有趣的人，却在逗比的道路上越走越远~
9楼2016-07-15 10:17:37
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