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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr结果第一次没有第二次有
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zhongdada

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr结果第一次没有第二次有 已有2人参与

从小鼠的组织中提取了DNA做pcr，用聚丙烯酰胺凝胶电泳后看结果，做了第一次所有组织都没有目的条带，第二次某些组织有目的条带。这个实验做过很多次了的，所有组织都没有条带是不正常的，第二次做的才是正常的。现在问题就是我做第一次和第二次的步骤操作都是一样的，pcr仪也是同一台，为什么第一次所有组织都没有条带？是哪里出现了问题？求助各位大神
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1楼 2016-06-14 21:27:50
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 分子 生物版块鼓励您发帖积极交流，myprayer祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-15 22:20:42
分子实验有时就这样，不知道为什么做出来了，也不知道为什么做不出来。所以分子实验，一般点背时不做的。
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2楼2016-06-14 22:33:54
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苏莫离

新虫 (初入文坛)
可萌是配制体系时加样出错（比如忘了加），每个组织做两个重复试试吧

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3楼2016-06-14 23:08:30
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zhongdada

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-06-14 22:33:54
分子实验有时就这样，不知道为什么做出来了，也不知道为什么做不出来。所以分子实验，一般点背时不做的。

4楼2016-06-15 21:20:42
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zhongdada

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 苏莫离 at 2016-06-14 23:08:30
可萌是配制体系时加样出错（比如忘了加），每个组织做两个重复试试吧

之前也有出现几次这种情况，所以每次一做这个实验就会特别小心，我确定是没有加错的，也没有加漏。打算有空的时候重复一下试试。
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5楼2016-06-15 21:22:46
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jkamm

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这种加少加漏问题很少发生对于试验员来说，只能说一次生产量很少，所以两次成功了，就怕是一次、二次都P不出来。。。
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6楼2016-06-17 10:30:31
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wenhuoyeying

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-06-14 22:33:54
分子实验有时就这样，不知道为什么做出来了，也不知道为什么做不出来。所以分子实验，一般点背时不做的。

这个解释好有道理，我竟然无言以对。。。。

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7楼2016-06-17 22:22:31
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kungfu2016

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-06-14 22:33:54
分子实验有时就这样，不知道为什么做出来了，也不知道为什么做不出来。所以分子实验，一般点背时不做的。

只管结果，pcr原因太多，不要去追寻答案，没必要

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8楼2016-06-17 23:00:20
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