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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒酶切跑胶没有目的条带
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丫头的格格巫

新虫 (初入文坛)

[交流] 质粒酶切跑胶没有目的条带 已有9人参与

连接产物转化后挑克隆，摇菌，试剂盒提质粒，然后酶切，跑胶。照胶后胶上面只有marker。其它什么都没有。接着将质粒直接跑胶，也什么都没有。求助各位～

质粒酶切跑胶没有目的条带


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1楼 2016-06-07 23:33:55
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gxzrqrz48

新虫 (小有名气)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-08 06:53:38
平板中克隆多吗？如果少的话可能是假阳性，如果多的话，可以在多挑几个试试

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2楼2016-06-07 23:42:00
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18283565942

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能质粒没有提取出来，再提一次试试

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3楼2016-06-07 23:45:50
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丫头的格格巫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gxzrqrz48 at 2016-06-07 23:42:00
平板中克隆多吗？如果少的话可能是假阳性，如果多的话，可以在多挑几个试试

平板克隆不是很多，但如果假阳性再怎么也应该有条带啊。用的A?的抗性，如果没有带相同抗性的质粒在菌体的话。应该也不会生长的吧～

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4楼2016-06-08 00:11:05
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丫头的格格巫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 18283565942 at 2016-06-07 23:45:50
可能质粒没有提取出来，再提一次试试

就是不知道哪里出了问题，从来没有过啊。

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5楼2016-06-08 00:11:34
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黄启秀

新虫 (正式写手)
菌P没做吗？

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6楼2016-06-08 09:19:33
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丫头的格格巫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 黄启秀 at 2016-06-08 09:19:33
菌P没做吗？

没做过，咋整？

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7楼2016-06-08 09:35:07
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黄启秀

新虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 鼓励积极回帖 2016-06-12 06:58:42
引用回帖:
7楼: Originally posted by 丫头的格格巫 at 2016-06-08 09:35:07
没做过，咋整？
...

没有菌液了吗，有的话做个菌P   初步鉴定是否连接转化成功，如果成功，再排除是不是质粒提取出了问题，或是酶切没切好……  如果都没问题那就是没有连接转化成功  就重新做

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8楼2016-06-08 21:25:52
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黄启秀

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 丫头的格格巫 at 2016-06-08 09:35:07
没做过，咋整？
...

还有质粒测浓度了吗  质量怎么样？

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9楼2016-06-08 21:27:05
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丫头的格格巫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 黄启秀 at 2016-06-08 21:27:05
还有质粒测浓度了吗  质量怎么样？
...

我重新提了质粒，原来试剂盒里面没有加乙醇，我竟然忽视了～但是更神奇的是我今天酶切片段好奇怪。

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10楼2016-06-08 22:51:02
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