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荧光定量PCR，溶解曲线出现双峰已有4人参与
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在做质粒标准曲线时，看溶解曲线的效果挺好的，是单一的峰，如图1所示，但当做环境样品时，溶解曲线取出现双峰，如图2所示，请问这是问什么？是我的引物不好，还是模板的问题？ 1.png  2.png |
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6楼2016-05-18 20:03:27
8楼2016-05-18 22:15:32
wangranjun
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2楼2016-05-12 22:12:23
jackyoung
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9楼2016-05-19 00:26:51
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-12 17:47:11
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我用不同的染料跑同一个模板，有些有双峰，有些是单峰，你可以跑一下定量温度梯度pcr，可能不同的退火温度对它也有影响！ 发自小木虫Android客户端 |
12楼2016-05-20 18:12:00
3楼2016-05-12 23:03:26
nealandmoz
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4楼2016-05-13 00:37:12
jackyoung
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你拿质粒跟样品比是不是有点儿理想化？质粒结果只能证明能括增出来，无法判断特异性。如果你要做样品的情况，就必需首先从样品中得到正确的结果。 曾经有一师妹脑子犯抽，玉米的基因用原始载体做过，结果后续实验拿错了样品，用拟南芥的做了半天，结果各种郁闷。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-05-13 08:57:24
7楼2016-05-18 20:04:05
10楼2016-05-20 10:58:21