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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 实时荧光定量PCR,溶解曲线怎么判断是否为目的产物
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水岸云边

新虫 (初入文坛)

[求助] 实时荧光定量PCR,溶解曲线怎么判断是否为目的产物 已有2人参与

请求各位大侠帮助：我最近在做RT-PCR,用的SYBR Green法，扩增完了然后跑溶解曲线，但是溶解曲线的图如下，不知道是否是我想要的产物，引物能否可用，求帮助分析.仪器为AB 7500fast

实时荧光定量PCR,溶解曲线怎么判断是否为目的产物
P50522-144144.jpg


实时荧光定量PCR,溶解曲线怎么判断是否为目的产物-1
P50522-104759.jpg
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1楼 2015-07-30 22:24:09
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gqyscnc

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
水岸云边: 金币+3, ★★★很有帮助, 很及时 2015-07-30 22:55:38
根据曲线初步判断，整个实验设计还可以！你做相对定量吗，将样品结果与对照看看基因表达量分析就可以了！ 如果绝对定量，需要进一步实验吧！
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2楼2015-07-30 22:35:07
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水岸云边

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gqyscnc at 2015-07-30 22:35:07
根据曲线初步判断，整个实验设计还可以！你做相对定量吗，将样品结果与对照看看基因表达量分析就可以了！ 如果绝对定量，需要进一步实验吧！

谢谢帮忙。对，是相对定量。我做的是亲本细胞和耐药细胞中基因表达变化，第一张图最后那俩个稍微平坦的是不加样本的阴性对照，其余三个都是加样的，ct值都是30左右，引物的话是可以用的吗？是不是代表我的样本表达量就是低
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3楼2015-07-30 22:47:07
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

基数期的溶解曲线为什么不是平的？
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4楼2016-03-22 20:05:36
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