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水岸云边

新虫 (初入文坛)

[求助] 实时荧光定量PCR,溶解曲线怎么判断是否为目的产物 已有2人参与

请求各位大侠帮助:我最近在做RT-PCR,用的SYBR Green法,扩增完了然后跑溶解曲线,但是溶解曲线的图如下,不知道是否是我想要的产物,引物能否可用,求帮助分析.仪器为AB 7500fast

实时荧光定量PCR,溶解曲线怎么判断是否为目的产物
P50522-144144.jpg


实时荧光定量PCR,溶解曲线怎么判断是否为目的产物-1
P50522-104759.jpg
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

基数期的溶解曲线为什么不是平的?
4楼2016-03-22 20:05:36
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gqyscnc

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
水岸云边: 金币+3, ★★★很有帮助, 很及时 2015-07-30 22:55:38
根据曲线初步判断,整个实验设计还可以!你做相对定量吗,将样品结果与对照看看基因表达量分析就可以了! 如果绝对定量,需要进一步实验吧!
2楼2015-07-30 22:35:07
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水岸云边

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gqyscnc at 2015-07-30 22:35:07
根据曲线初步判断,整个实验设计还可以!你做相对定量吗,将样品结果与对照看看基因表达量分析就可以了! 如果绝对定量,需要进一步实验吧!

谢谢帮忙。对,是相对定量。我做的是亲本细胞和耐药细胞中基因表达变化,第一张图最后那俩个稍微平坦的是不加样本的阴性对照,其余三个都是加样的,ct值都是30左右,引物的话是可以用的吗?是不是代表我的样本表达量就是低
3楼2015-07-30 22:47:07
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