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fukkim新虫 (著名写手)
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[求助]
实时定量PCR，NTC出现荧光曲线
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跟着一个博士 做了qPCR，probe是TaqMan，反应体系15uL。标准曲线非常好，R平方在3个9以上。 但是NTC有3个莫名其妙的浅绿色的曲线，x轴上非常向后。她是一个老手了，做了2年多了，她说这种污染好象无法解决。 说明一下她的操作：提取DNA和PCR过程中没有对枪尖和离心管进行灭菌，她说不必要。而且，没有加UNG酶。 我认为有可能是PCR过程中没有使用灭菌枪尖和离心管的原因，另外，也可能是二聚体? 请高手指教。 |
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2楼2012-07-22 16:55:29
tiani_tan
金虫 (小有名气)
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3楼2012-07-23 12:06:33
