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荧光定量PCR,溶解曲线出现双峰
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红太郎张玉
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专业: 分子与进化生态学
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]
荧光定量PCR,溶解曲线出现双峰
已有4人参与
在做质粒标准曲线时,看溶解曲线的效果挺好的,是单一的峰,如图1所示,但当做环境样品时,溶解曲线取出现双峰,如图2所示,请问这是问什么?是我的引物不好,还是模板的问题?
1.png
2.png
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1楼
2016-05-12 18:57:26
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jackyoung
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注册: 2009-06-26
性别: GG
专业: 园艺学与植物营养学
你拿质粒跟样品比是不是有点儿理想化?质粒结果只能证明能括增出来,无法判断特异性。如果你要做样品的情况,就必需首先从样品中得到正确的结果。
曾经有一师妹脑子犯抽,玉米的基因用原始载体做过,结果后续实验拿错了样品,用拟南芥的做了半天,结果各种郁闷。
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CestLaVie
5楼
2016-05-13 08:57:24
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wangranjun
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性别: GG
专业: 药物毒理
管辖:
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
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红太郎张玉: 金币+5,
★
有帮助
2016-05-18 20:03:49
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香,谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利,文章多多。
2016-06-12 17:46:58
标曲中只有一个峰,说明引物没有问题,后来出现双峰,可能是模板有问题。
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他日扬翼九万里,历大千世界,定我红尘心!
2楼
2016-05-12 22:12:23
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紫萸香慢001
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注册: 2015-12-26
专业: 皮肤免疫性疾病
模板浓度问题
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3楼
2016-05-12 23:03:26
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nealandmoz
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(初入文坛)
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虫号: 4464158
注册: 2016-03-04
专业: 生物物理、生物化学与分子
引物不好
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4楼
2016-05-13 00:37:12
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