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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR，溶解曲线出现双峰
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红太郎张玉

银虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR，溶解曲线出现双峰 已有4人参与

在做质粒标准曲线时，看溶解曲线的效果挺好的，是单一的峰，如图1所示，但当做环境样品时，溶解曲线取出现双峰，如图2所示，请问这是问什么？是我的引物不好，还是模板的问题？

荧光定量PCR，溶解曲线出现双峰
1.png


荧光定量PCR，溶解曲线出现双峰-1
2.png
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1楼 2016-05-12 18:57:26
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jackyoung

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 红太郎张玉 at 2016-05-18 20:03:27
是不是说引物不好...

不仅仅是好不好的事，包括浓度、反应条件都要摸索下。

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CestLaVie
9楼2016-05-19 00:26:51
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
红太郎张玉: 金币+5, ★有帮助 2016-05-18 20:03:49
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-12 17:46:58
标曲中只有一个峰，说明引物没有问题，后来出现双峰，可能是模板有问题。
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
2楼2016-05-12 22:12:23
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紫萸香慢001

新虫 (小有名气)
模板浓度问题

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3楼2016-05-12 23:03:26
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nealandmoz

新虫 (初入文坛)
引物不好

发自小木虫IOS客户端
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4楼2016-05-13 00:37:12
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