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重组质粒双酶切验证，载体条带可以看到，目的基因条带跑不出来 已有5人参与
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转染感受态细胞挑菌纯培养之后试剂盒小提质粒，右边图是提的质粒直接跑的pcr，左边是酶切之后再跑的，载体pc DNA3.1(+)，载体+目的基因应该大约六千，质粒五千，目的基因一千， 1.不知道为什么一直跑不出来一千的条带 2.挑一个菌落摇菌为什么质粒会有五千和六千两种？  发自小木虫Android客户端 |
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shx0743
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9楼2016-03-13 21:04:16
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【答案】应助回帖
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右边图提质粒后直接去做pcr的？不懂什么意思，那pcr目的条带应该是多大呢，你右边的图条带特异性也不好，看不出来什么。左边直接酶切的，我怎么看着你左上图，好多质粒根本没有切开呢，不知道你酶切体系和时间。还有提取码质粒直接电泳，一般都是会有两到三天带的，你所谓的五千和六千条带，实际上只是同一个质粒的不同构型而已，比如同一个质粒环状超螺旋和线性开环的，在电泳时候跑的位置是不一样的，。所以质粒没有酶切直接进行电泳，只可以定性的看看质粒是否提取成功以及提取的浓度，对质粒的大小没有参考价值，那需要进行酶切，才可以的，祝好！ 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-03-13 08:07:14
Bioexperixgs
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4楼2016-03-13 12:50:03
