| 查看: 5569 | 回复: 11 | ||
[求助]
重组质粒双酶切验证，载体条带可以看到，目的基因条带跑不出来 已有5人参与
|
||
|
转染感受态细胞挑菌纯培养之后试剂盒小提质粒，右边图是提的质粒直接跑的pcr，左边是酶切之后再跑的，载体pc DNA3.1(+)，载体+目的基因应该大约六千，质粒五千，目的基因一千， 1.不知道为什么一直跑不出来一千的条带 2.挑一个菌落摇菌为什么质粒会有五千和六千两种？  发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有91人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有1人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 双酶切条带弥散
已经有2人回复
- 质粒重组后双酶切没有条带，求大神帮忙分析一下
已经有1人回复
- 求助！双酶切验证总切出来四条带，请亲们帮忙看看，非常着急啊！谢谢大家了！
已经有32人回复
- 崩溃！！易错pcr重组质粒构建总是失败！！求大神指导！
已经有8人回复
- 双酶切后
已经有4人回复
- 重组质粒双酶切后没有条带
已经有20人回复
- 重组载体转化农杆菌，目的片段小了什么原因？
已经有1人回复
- 很奇怪的酶切连接问题
已经有13人回复
- 求高手解惑：重组质粒酶切检验不出来
已经有2人回复
- （侯氏出品）双酶切连接反应之全攻略
已经有89人回复
- 关于酶切验证克隆的一点点小疑问！
已经有5人回复
- 双酶切验证
已经有0人回复
- 【求助/交流】重组子酶切验证很奇怪
已经有4人回复
- 质粒酶切问题
已经有1人回复
shx0743
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2663.2
- 散金: 172
- 红花: 7
- 沙发: 1
- 帖子: 313
- 在线: 117.7小时
- 虫号: 4124026
- 注册: 2015-10-07
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
9楼2016-03-13 21:04:16
2楼2016-03-12 22:31:32
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
右边图提质粒后直接去做pcr的？不懂什么意思，那pcr目的条带应该是多大呢，你右边的图条带特异性也不好，看不出来什么。左边直接酶切的，我怎么看着你左上图，好多质粒根本没有切开呢，不知道你酶切体系和时间。还有提取码质粒直接电泳，一般都是会有两到三天带的，你所谓的五千和六千条带，实际上只是同一个质粒的不同构型而已，比如同一个质粒环状超螺旋和线性开环的，在电泳时候跑的位置是不一样的，。所以质粒没有酶切直接进行电泳，只可以定性的看看质粒是否提取成功以及提取的浓度，对质粒的大小没有参考价值，那需要进行酶切，才可以的，祝好！ 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-03-13 08:07:14
Bioexperixgs
新虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 672.9
- 散金: 337
- 红花: 8
- 帖子: 330
- 在线: 39.2小时
- 虫号: 2330746
- 注册: 2013-03-08
- 专业: 病原微生物变异与耐药
4楼2016-03-13 12:50:03
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
质粒在提取的过程中，会由于机械损伤等原因，导致出现两到三条带，即CCC,OC,L三种构型，进行凝胶电泳的时候泳动速度不同，从而会看到两到三天带。提取质量比较好的话会有两条，一般是三条 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-03-13 13:19:06
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
6楼2016-03-13 14:52:32
thinka
铜虫 (著名写手)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 2614.5
- 散金: 170
- 红花: 8
- 帖子: 2781
- 在线: 112.8小时
- 虫号: 916724
- 注册: 2009-11-30
- 专业: 老年医学
7楼2016-03-13 16:53:31
Bioexperixgs
新虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 672.9
- 散金: 337
- 红花: 8
- 帖子: 330
- 在线: 39.2小时
- 虫号: 2330746
- 注册: 2013-03-08
- 专业: 病原微生物变异与耐药
8楼2016-03-13 18:10:32
10楼2016-03-14 10:16:17
