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PrimerSTAR和ExTaq PCR出来的条带不一样大怎么回事 已有4人参与
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楼主想要从菌种的基因组中克隆一段序列,用ExTaq PCR之后测序总是有那么一两个位点发生突变,换用PrimerSTAR PCR发现P出来的条带居然大了大概800bp,相同的引物和PCR条件 这有可能吗,求大神解答 |
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aoluoquan
银虫 (正式写手)
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7楼2016-03-05 13:47:58
2楼2016-03-04 21:31:16
原海亮
木虫 (著名写手)
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- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
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首先确保高保真酶的扩增条件正确,变性温度和时间等,另外taq酶的扩增条件不适用于高保真酶,这种现象在实验室很常见,所以基本我们都会用高保真酶重新摸索退火温度等条件。 发自小木虫Android客户端 |

3楼2016-03-04 21:45:32
4楼2016-03-04 22:16:24









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