应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗？ 求指点 谢谢~
71/1返回列表
查看: 1484  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

think-edge

金虫 (小有名气)

[交流] 大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗？ 求指点 谢谢~ 已有4人参与

 http://\"大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗？  求指点  谢谢~\"
我没有用Clontech的Advantage 2 PCR kit，而是用用了takara的primerstar进行了“LD-PCR”，延伸时间7min（+5s each cycle），25个循环，结果如图示，没有经验，不知道是不是没有扩增成功啊？  求指定 1和2为样品扩增副孔，貌似smear条带与阳性对照相比弱好多，这个怎么解决？  可以用于下一步纯化，然后与线性化的rec载体共转酵母Y187吗？  

谢谢~  祝好！

 http://\"大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗？  求指点  谢谢~-1\"
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-10-28 10:50:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

think-edge

金虫 (小有名气)
http://image.keyan.cc/data/bcs/2 ... _1414464747_973.jpg

大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗？  求指点  谢谢~-2
LD-PCR.jpg
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-28 10:53:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by think-edge at 2014-10-28 10:53:02
http://image.keyan.cc/data/bcs/2014/1028/w98h1229923_1414464747_973.jpg


LD-PCR.jpg

你那个合成的量肯定不够的，加几个循环试试

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-11-10 10:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

think-edge

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-11-10 10:01:16
你那个合成的量肯定不够的，加几个循环试试
...

嗯  谢谢您  我已经买了clontech的advantage重新扩增了   现在纯化后有2.5ug   打算拿这个建库

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-10 12:56:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meng蓝色桃子

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by think-edge at 2014-11-10 12:56:30
嗯  谢谢您  我已经买了clontech的advantage重新扩增了   现在纯化后有2.5ug   打算拿这个建库
...

你好，请问你的库构建好了吗？我的LD-PCR产物过柱纯化后就没了，请问你知道是什么原因吗，困惑许久了，谢谢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2017-04-15 07:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanjingping

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by meng蓝色桃子 at 2017-04-15 07:59:20
你好，请问你的库构建好了吗？我的LD-PCR产物过柱纯化后就没了，请问你知道是什么原因吗，困惑许久了，谢谢
...

LD-PCR产物过柱纯化后就没了什么原因可以告知下吗？
赞一下 回复此楼
6楼2017-04-15 11:22:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wpjshr

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yuanjingping at 2017-04-15 11:22:54
LD-PCR产物过柱纯化后就没了什么原因可以告知下吗？...

同求
回复此楼
7楼2017-04-18 18:52:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 think-edge 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +4 Mr. Z 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:44 by haxia
[考研] 0856求调剂 +3 zhn03 2026-03-25 3/150 2026-03-25 18:04 by king123！
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +3 小小陈小小 2026-03-22 5/250 2026-03-25 16:29 by 求调剂zz
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭