24小时热门版块排行榜    

查看: 1670  |  回复: 6

think-edge

金虫 (小有名气)

[交流] 大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗? 求指点 谢谢~ 已有4人参与

 http://\"大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗?  求指点  谢谢~\"
我没有用Clontech的Advantage 2 PCR kit,而是用用了takara的primerstar进行了“LD-PCR”,延伸时间7min(+5s each cycle),25个循环,结果如图示,没有经验,不知道是不是没有扩增成功啊?  求指定 1和2为样品扩增副孔,貌似smear条带与阳性对照相比弱好多,这个怎么解决?  可以用于下一步纯化,然后与线性化的rec载体共转酵母Y187吗?  

谢谢~  祝好!

 http://\"大家帮我看看你这个扩增后的cDNA能用于建酵母双杂交文库吗?  求指点  谢谢~-1\"
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

think-edge

金虫 (小有名气)

2楼2014-10-28 10:53:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by think-edge at 2014-10-28 10:53:02
http://image.keyan.cc/data/bcs/2014/1028/w98h1229923_1414464747_973.jpg


LD-PCR.jpg

你那个合成的量肯定不够的,加几个循环试试

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-11-10 10:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

think-edge

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-11-10 10:01:16
你那个合成的量肯定不够的,加几个循环试试
...

嗯  谢谢您  我已经买了clontech的advantage重新扩增了   现在纯化后有2.5ug   打算拿这个建库

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-11-10 12:56:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meng蓝色桃子

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by think-edge at 2014-11-10 12:56:30
嗯  谢谢您  我已经买了clontech的advantage重新扩增了   现在纯化后有2.5ug   打算拿这个建库
...

你好,请问你的库构建好了吗?我的LD-PCR产物过柱纯化后就没了,请问你知道是什么原因吗,困惑许久了,谢谢

发自小木虫Android客户端
5楼2017-04-15 07:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanjingping

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by meng蓝色桃子 at 2017-04-15 07:59:20
你好,请问你的库构建好了吗?我的LD-PCR产物过柱纯化后就没了,请问你知道是什么原因吗,困惑许久了,谢谢
...

LD-PCR产物过柱纯化后就没了什么原因可以告知下吗?
6楼2017-04-15 11:22:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wpjshr

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yuanjingping at 2017-04-15 11:22:54
LD-PCR产物过柱纯化后就没了什么原因可以告知下吗?...

同求
7楼2017-04-18 18:52:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 think-edge 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-16 03:38 by DgNGHc3h5tPl
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 03:35 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-16 03:14 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:50 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 02:23 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:14 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 申博发邮件 +4 Lmengk 2026-09-15 4/200 2026-09-16 00:05 by 木心想继续深造
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:59 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:35 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:39 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-15 16:26 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 15:02 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-15 14:10 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
请填处理意见